[发明专利]大麦花药快速培养法及所用培养基

权利要求书

1.大麦花药培养基，其特征是：包括预处理培养基、诱导培养基以及分化/生根培养基；

所述预处理培养基由以下含量的组分组成：

甘露醇175～185g/L，琼脂14～16g/L，其余为蒸馏水；

所述诱导培养基的制备方法如下：

每升诱导基液先调节至pH为5.7～5.9，然后加入14～16g的琼脂；接着进行高温灭菌处理，待温度回落至50～60℃时，再加入过滤灭菌后的浓度为740～760mg/ml的谷氨酰胺溶液、浓度为90～110mg/ml的肌醇溶液、浓度为0.35～0.45mg/ml的维生素B1溶液、浓度为0.9～1.1mg/ml的吲哚乙酸溶液和浓度为0.9～1.1mg/ml的6-苄基氨基嘌呤溶液各1ml；

所述诱导基液由以下含量的组分组成：

KNO₃1850～1950mg/L，NH₄NO₃160～170mg/L，CaCl₂·2H₂O 430～450mg/L，KH₂PO₄160～180mg/L，MgSO₄·7H₂O 360～380mg/L，NaFeEDTA 35～45mg/L，H₃BO₃6.0～6.4mg/L，MnSO₄·4H₂O 22～22.5mg/L，ZnSO₄·7H₂O 8.5～9.0mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.20～0.30mg/L，KI 0.80～0.90mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.020～0.030mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.020～0.030mg/L，麦芽糖90～110g/L，其余为蒸馏水；

所述分化/生根培养基的制备方法为：在每L MS基本培养基内加入蔗糖18～22g后，先调pH至6.4～6.6，再加入植物凝胶3.5～4.5g；最后高温灭菌。

2.根据权利要求1所述的大麦花药培养基，其特征是：

所述预处理培养基由以下含量的组分组成：

甘露醇182g/L，琼脂15g/L，其余为蒸馏水；

所述诱导培养基的制备方法中：谷氨酰胺溶液的浓度为750mg/ml、肌醇溶液的浓度为100mg/ml、维生素B₁(VB₁)溶液的浓度为0.4mg/ml、吲哚乙酸(IAA)溶液的浓度为1.0mg/ml，6-苄基氨基嘌呤(BAP)溶液的浓度为1.0mg/ml；琼脂的加入量为15g；

所述诱导基液由以下含量的组分组成：

KNO₃1900mg/L，NH₄NO₃165mg/L，CaCl₂·2H₂O 440mg/L，KH₂PO₄170mg/L，MgSO₄·7H₂O 370mg/L，NaFeEDTA 40mg/L，H₃BO₃6.2mg/L，MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L，ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg/L，KI 0.83mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，麦芽糖100g/L，其余为蒸馏水；

所述分化/生根培养基的制备方法中：蔗糖的加入量为20g，植物凝胶的加入量为4g。

3.利用如权利要求1或2所述的大麦花药培养基所进行的大麦花药快速培养法，其特征是依次包括以下步骤：

1)、在田间取小孢子发育处于单核中期的麦穗，在无菌操作台上灭菌、晾干后，用灭菌刀片取出叶鞘中的穗子，再用尖头镊子取出穗子里的花药，放入位于培养皿内的预处理培养基上，封上封口膜；20～25℃黑暗环境下培养3～5天；得预处理后花药；

2)、将预处理后花药转移到位于培养皿内的诱导培养基上，用封口膜封好培养皿，20～25℃黑暗环境下培养4～5周；

3)、将步骤2)诱导所得的愈伤组织和苗转移至分化/生根培养基上；于22～25℃光照培养，光照时间每天12小时，光照强度为40～60μmol/m²/s；培养3～4周后，得生根绿苗。