[发明专利]一种具有肿瘤细胞抑制功能的多核苷酸

说明书

技术领域

本发明属于生物制药领域；更具体地，本发明涉及一种具有肿瘤细胞抑制功能的多核苷酸。

背景技术

真核生物mRNA的3’非翻译区(UTR)是重要的调控区域，控制着该mRNA所携带的基因信息表达为功能蛋白质的许多重要阶段。但是，在2010年11月之前，对于高等真核生物细胞中是否有单独的、脱离mRNA其它部分的3’UTR RNA存在，以及如果存在，它们有什么功能，国际科学界仍不清楚(Mercer TR，Wilhelm D，Dinger ME，Soldà G，Korbie DJ，Glazov EA，et al.，Expression of distinct RNAs from 3’untranslated regions.Nucleic Acids Res.2011 Mar；39(6)：2393-403.Epub 2010 Nov 12)。

本发明人早在1991-1992年间就已发现，人白介素6核转录因子(后称为C/EBPβ)基因mRNA的3’UTR，在单独导入恶性细胞时，能表现肿瘤抑制功能，即抑制恶性细胞的生长增殖[刘定干、野田亮、王达、陈珍珍、井川洋二、李载平，具有抗癌基因活性的一个cDNA克隆，中国科学1991；7：730-737；刘定干、朱丽华、陈珍珍、野田亮、郭礼和、李载平，具有抗癌基因活性的一个cDNA克隆的核苷酸序列，生物化学与生物物理学报1991；23(3)：246-249；刘定干、审良静男、岸本忠三、李载平，回复系RR中一种与回复相关的蛋白表达增强，中国科学1995；25(4)：372-378]。之后长期的研究表明，该3’UTR的肿瘤抑制功能具有普遍性，对于来自小鼠的恶性DT细胞(用癌基因Ras恶性转化NIH/3T3细胞而得)和来自人的SMMC-7721【Ding-Gan Liu，Qiu-Hong Jiang，Yun-Yi Wei，Li Sun，Bei-Bei Fu，Fu-Kun Zhao，Qiong Zhou.Gene expression profile favoring phenotypic reversion：a clue for mechanism of tumor suppression by NF-IL6 3’UTR.Cell research(2003)；13(6)：509-514】等肿瘤细胞均具有显著的抑制作用。进一步的研究揭示，该3’UTR的肿瘤抑制功能的分子机制是通过与细胞癌基因蛋白----蛋白激酶Cε的物理结合，抑制蛋白激酶Cε的磷酸化活力[Ying Wang，Da-Quan Sun，Ding-Gan Liu，Tumor Suppression by RNA from C/EBPβ3’UTR through the Inhibition of Protein Kinase Ce Activity，PLoS ONE January 2011|Volume 6|Issue 1|e16543]。

尽管全长C/EBPβ基因3’UTR的抗肿瘤功能已有较深入的研究，但其作为一种长度在280多个碱基的片段在应用上是受到限制的，而更短的片段在合成上具有更大的优势。但是，C/EBPβ基因3’UTR区域的较小片段是否独立地发挥作用，且怎样的片段能够发挥作用却仍然是不清楚的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有肿瘤细胞抑制功能的多核苷酸。

在本发明的第一方面，提供一种分离的多核苷酸，其选自：

(a)核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的核糖核酸；

(b)核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示的脱氧核糖核酸；

(c)在严格条件下能够与(a)或(b)限定的核苷酸序列杂交且具有抑制肿瘤功能的多核苷酸；

(d)与(a)或(b)限定的核苷酸序列有70％以上(优选80％以上，更优选90％以上，更优选95％以上，更优选98％以上)相同性(同源性)且具有抑制肿瘤功能的多核苷酸；

(e)将(a)或(b)限定的核苷酸序列经过一个或多个(如1-5个；较佳地1-4个；更佳地1-3个；更佳地1-2个)碱基的取代、缺失或添加而形成的，且具有抑制肿瘤功能的多核苷酸；或

(f)核苷酸序列与(a)-(e)任一限定的多核苷酸序列互补(较佳地，为完全互补)的多核苷酸。

在另一优选例中，所述的多核苷酸是天然分离的，或是人工合成的。

在另一优选例中，所述的多核苷酸长度在40-100bp；较佳地长度在50-80bp；较佳地在55-70bp。