[发明专利]一种乳制品中α-乳白蛋白含量的检测方法

权利要求书

1.一种乳制品中α-乳白蛋白含量的检测方法，其包括如下步骤：提取乳制品中的α-乳白蛋白，再通过高效液相色谱法测定含量；所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱为C₁₈色谱柱，等度洗脱，检测波长为210-230nm，洗脱液由流动相A和流动相B组成，所述流动相A和所述流动相B的体积比为80∶20-82∶18；所述流动相A为体积分数0.05-0.15％的三氟乙酸的超纯水溶液，所述流动相B为乙腈、超纯水和三氟乙酸的混合液，所述流动相B中：所述乙腈和超纯水的体积比为320∶100-480∶100，所述超纯水和三氟乙酸的体积比为100∶0.4-100∶0.6。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的C₁₈色谱柱为Agilent ZORBOX ECLIPSE XDB-C₁₈柱；和/或，所述的检测波长为215nm。

3.如权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件还包括：流动相总流速为0.5-1.0mL/min，较佳地为0.8mL/min；柱温为30-40℃，较佳地为35℃。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的乳制品为液体乳或乳粉。

5.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述提取乳制品中的α-乳白蛋白的方法按下述操作方式进行：

①离心脱脂：将所述的乳制品离心，去除脂肪得脱脂样品；

②净化：将pH值为4.6的醋酸盐缓冲液和所述的脱脂样品混合均匀，离心后取上清液；

③过滤：过滤所述的上清液，得上机液。

6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤①中所述离心的温度为1-4℃；所述离心的速度为3500-4500转/分钟；所述离心的时间为10-15min。

7.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤①中所述的乳制品以液态形式进行离心，当所述的乳制品为乳粉时，需将所述的乳粉与水混合得乳液，再进行离心，乳粉与水的混合比例较佳地为1g乳粉∶5mL水-1g乳粉∶15mL水；和/或，步骤①中所述的脱脂样品于-20℃保存，在24小时内进行步骤②即可。

8.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤②中所述醋酸盐缓冲液中醋酸的浓度为0.08-0.12mol/L；和/或，步骤②中所述的醋酸盐缓冲液和所述的脱脂样品的体积比为4∶1-6∶1。

9.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤②中所述混合均匀采用漩涡振荡器振荡1-2min；和/或，步骤②中所述离心的温度为1-4℃；所述离心的速度为6000-8000转/分钟；所述离心的时间为8-10min。

10.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤③中所述的过滤采用0.45μm的滤膜进行。