[发明专利]一种天然抗氧化剂金福菇多糖的制备方法有效
申请号: | 201210014537.4 | 申请日: | 2012-01-18 |
公开(公告)号: | CN102603908A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 陈彦;王翠;王瑞君;胡美丽;段培鲁;翟天龙 | 申请(专利权)人: | 安徽大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;G01N30/02;A23L3/3562 |
代理公司: | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 | 代理人: | 余成俊 |
地址: | 230601 安徽省合*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 天然 抗氧化剂 金福菇 多糖 制备 方法 | ||
1.一种天然抗氧化剂金福菇多糖的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)将样品金福菇烘至恒重,粉碎,过0.55mm筛;
(2)称取步骤(1)所得粉末,在80-90℃温度的热水中浸提2-4h,料液比1:10-40,提取液浓缩后,3300-3800r/min离心18-22min,取上清液;
(3)将步骤(2)所得上清液浓缩至原体积的1/9-1/10,然后加入3.8-4.2倍体积的无水乙醇沉淀过夜,3300-3800r/min离心18-22min,收集沉淀物,冷冻干燥,得金福菇粗多糖;
(4)将步骤(3)所得金福菇粗多糖加入到18-22倍质量的蒸馏水溶解,按体积比1:1加入Sevag试剂,剧烈振荡25-35min,3300-3800r/min离心18-22min,取上清液,浓缩、冷冻干燥得固体金福菇多糖。
2.根据权利要求1所述的天然抗氧化剂金福菇多糖的制备方法,其特征在于:所述的固体金福菇多糖抗氧化活性检测:
a:将步骤(4)所得固体金福菇多糖配成10%溶液,用DEAE-Sephorase F.F凝胶柱纯化,上样量为10mL,0-1mol/LNaCl溶液梯度洗脱,流速为1mL/min,自动部份收集器收集洗脱液,苯酚-硫酸法跟踪检测,经3.5×103Da的透析袋透析后,浓缩、冷冻干燥得到纯化的金福菇多糖TL-1;
b:将步骤a所得固体金福菇多糖配成0.1%的溶液,过0.22μm的过滤膜,用Superdex 200层析柱分离,0.02mol/L PBS洗脱,流速1mL/min,波长215nm紫外检测,同时用苯酚-硫酸跟踪检测,收集的含糖组分用3.5×103Da的透析袋透析脱盐,透析液浓缩、冷冻干燥得两个金福菇多糖组分TL-2和TL-3;
c:对得到的固体金福菇多糖TL-1、TL-2和TL-3进行体外抗氧化活性实验,结果表明:提取得到的金福菇多糖,尤其是TL-3,具有很高的清除超氧阴离子自由基及抑制小鼠红细胞溶血MEH和丙二醛MDA的产生的活性。
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