[发明专利]同时检测水产品中醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚残留的试剂盒

权利要求书

1.一种同时检测水产品中醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚残留的试剂盒，包括抗体，其特征在于，所述的抗体是针对醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚的单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的抗体的制备方法是以醋酸甲羟孕酮以及己烯雌酚分别与牛血清白蛋白的偶联物作为免疫原，制备出单克隆抗体，并将之生物素化。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中的抗原为醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚分别与卵清白蛋白偶联获得的产物。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括SA-PE溶液和终止液。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚的标准品溶液。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，标准品溶液的浓度包括25ng/mL、12.5ng/mL、6.25ng/mL、3.125ng/mL、1.6ng/mL、0.8ng/mL和0.4ng/mL。

7.权利要求1所述的试剂盒的应用，其特征在于，利用该试剂盒同时检测水产品中醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚残留，包括以下步骤：

前处理待测样品；

用权利要求1-6中的任意一种试剂盒检测样品。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述前处理待测样品的步骤包括：匀浆好的组织加入乙酸乙酯和CaCl₂；离心，移取上清，氮气吹干；残留物用正己烷溶解，再加入PBS-甲醇，离心；吸除上层正己烷，取下层溶液用于检测。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的检测水产品中醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚残留的步骤依次为：偶联有MPA和DES的微球加入处理好的醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚样品溶液，随后分别加入生物素化的醋酸甲羟孕酮和己烯雌酚抗体；然后加入稀释的SA-PE，最后加入终止液，检测荧光强度。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述前处理待测样品的步骤包括：准确称取已匀浆好的组织3.0g，加入9mL乙酸乙酯，然后加入0.3CaCl₂，最大速度震荡3min；室温条件下，6000rpm离心5min；移取6mL上清到另一新的试管，60-70℃水浴氮气吹干，残留物用2.0mL的正己烷溶解，残留物用2.0mL的正己烷溶解，再加入1.0mL的1×PBS-甲醇(3∶2，v/v)，漩涡振荡2min；室温条件下，6000rpm离心10min，吸除上层正己烷，取50uL下层溶液用于检测。