[发明专利]可用于诱导肝细胞损伤的RNA干扰靶点

权利要求书

1.靶向FAH的RNA干扰靶点，其序列选自：

(1)SEQ ID NO：1-5中任何一个所示的序列，或者

(2)在严紧条件或者高度严紧条件下与(1)中序列能够杂交的核苷酸序列，或者

(3)与(1)中序列仅有1个核苷酸不同的序列；或者

(4)上述序列的互补序列。

2.包含权利要求1的RNA干扰靶点的核酸构建体。

3.包含权利要求1的RNA干扰靶点的载体。

4.根据权利要求1所述的RNA干扰靶点获得的、能够抑制FAH基因的表达的siRNA。

5.一种重组表达载体，其可表达权利要求4的siRNA。

6.权利要求5的重组表达载体，其包含靶向FAH的siRNA的编码核酸序列，所述编码核酸序列与表达控制序列可操作地连接，使得可在细胞中表达所述的siRNA。

7.权利要求6的重组表达载体，其中所述细胞是动物细胞，例如哺乳动物细胞。

8.权利要求5的重组表达载体，其是质粒载体或病毒载体。

9.权利要求8的重组表达载体，其中所述病毒载体是逆转录病毒载体。

10.权利要求9的重组表达载体，其中所述逆转录病毒载体是慢病毒载体。

11.转化或转染或转导了权利要求5-10任一项的重组表达载体的分离的细胞。

12.一种改造的分离的细胞，其可表达或包含有权利要求4的siRNA。

13.权利要求12的改造的细胞，其在基因组中或者基因组外携带权利要求1所述的RNA干扰靶点的编码核酸序列，所述编码核酸序列与表达控制序列可操作地连接，使得可在该细胞中表达所述siRNA。

14.权利要求13的改造的细胞，其中所述细胞是动物细胞，例如哺乳动物细胞。

15.制备权利要求11-14任一项的细胞的方法，其包括用权利要求5-12的重组表达载体转化或转染或转导细胞。

16.DNA的组合，其包括编码正义RNA片段的第一DNA序列和编码反义RNA片段的第二DNA序列，或者由编码正义RNA片段的第一DNA序列和编码反义RNA片段的第二DNA序列组成，所述正义RNA片段的靶序列为权利要求1的RNA干扰靶点所编码的RNA序列，反义RNA片段和正义RNA片段能形成双链RNA，该双链RNA能抑制FAH基因的表达。

17.小干扰RNA(siRNA)，其包括正义RNA片段和反义RNA片段，所述正义RNA片段的靶序列为权利要求1的RNA干扰靶点编码的RNA序列，反义RNA片段和正义RNA片段能形成双链RNA，且该双链RNA能抑制FAH基因的表达。

18.权利要求4的siRNA、或权利要求5-10任一项的重组表达载体、或权利要求11-14任一项的细胞、或权利要求16的DNA的组合、或权利要求17的siRNA在制备药物或组合物中的用途，所述药物或组合物可用于抑制FAH基因的表达、或诱导肝细胞损伤或产生肝脏损伤的小鼠。

19.诱导小鼠肝脏损伤的方法，其包括将有效量的权利要求4的siRNA或权利要求5-10任一项的重组表达载体或权利要求16的DNA的组合或权利要求17的siRNA导入小鼠体内。

20.抑制FAH基因的表达的方法，其包括将有效量的权利要求4的siRNA或权利要求5-10任一项的重组表达载体或权利要求16的DNA的组合或权利要求17的siRNA导入细胞。