[发明专利]一种注射用复方维生素（3）冻干粉针剂及其制备方法和分析方法

权利要求书

1.一种注射用复方维生素（3）冻干粉针剂，其特征在于，所述注射用复方维生素（3）冻干粉针剂包括：维生素B₁ 5~15重量份、核黄素磷酸钠3~8重量份（扣除结晶水计）、维生素C 150~250重量份和甘氨酸350~500重量份，且制备过程中用作溶剂并最终除去的注射用水1000~5000重量份。

2.根据权利要求1所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂，其特征在于，所述注射用复方维生素（3）冻干粉针剂包括：维生素B₁ 10重量份、核黄素磷酸钠6.355重量份（扣除结晶水计）、维生素C 200重量份和甘氨酸400重量份，且制备过程中用作溶剂并最终除去的注射用水3000重量份。

3.根据权利要求1所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂，其特征在于，所述注射用复方维生素（3）冻干粉针剂包括：维生素B₁ 10重量份、核黄素磷酸钠6.355重量份（扣除结晶水计）、维生素C 200重量份和甘氨酸450重量份，且制备过程中用作溶剂并最终除去的注射用水4000重量份。

4.根据权利要求1所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂，其特征在于，所述注射用复方维生素（3）冻干粉针剂还包括pH调节剂，所述pH调节剂选自盐酸、磷酸、柠檬酸、氢氧化钠、氢氧化钾和磷酸氢钠中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂，其特征在于，所述pH调节剂的加入量使所述注射用复方维生素（3）冻干粉针剂在冷冻干燥前的溶液pH值为3.0~4.5。

6.根据权利要求4所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂，其特征在于，所述pH调节剂的加入量使所述注射用复方维生素（3）冻干粉针剂在冷冻干燥前的溶液pH值为3.5~4.5。

7.权利要求1-6任一项所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

（1）称取甘氨酸，加注射用水配制成10%~35%的甘氨酸溶液，再分别称取维生素B₁、核黄素磷酸钠、维生素C，依次加入甘氨酸溶液中搅拌溶解，加注射用水至约80%~90%总配液量，搅拌均匀；

（2）将步骤（1）所得的溶液用pH调节剂调节pH值至规定范围，加针用活性炭吸附15分钟，除炭过滤；

（3）将步骤（2）所得的滤液补加注射用水至配液全量，经0.22μm滤器过滤，将滤液无菌灌装；

（4）将步骤（3）所得的灌装的药液冷冻干燥，轧盖，即得。

8.根据权利要求7所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，针用活性炭的加入量为步骤（1）所得溶液的0.03% (g/ml) ，并且在吸附过程中充氮搅拌。

9.根据权利要求7所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述的冷冻干燥程序为：搁板温度降至-45℃，制品温度降至-36℃以下时，将搁板回温至-35～-10℃左右，再将搁板制冷至-45℃以下保持1～6小时，启动真空泵，制品开始升华，搁板按1～8℃/小时升温至25℃，制品接近搁板温度时保持3-8小时。

10.根据权利要求7所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述的冷冻干燥程序为：搁板温度降至-45℃，制品温度降至-36℃以下时，将搁板回温至-30～-15℃左右，再将搁板制冷至-45℃以下保持1～3小时，启动真空泵，制品开始升华，搁板按2～5℃/小时升温至25℃，制品接近搁板温度时保持6小时。

11.权利要求1-6任一项所述的注射用复方维生素（3）冻干粉针剂的分析方法，其特征在于，采用高相液相色谱法对所述注射用复方维生素（3）冻干粉针剂中的不稳定主药的有关物质进行检测，具体分析项目、分析条件及步骤如下：

（1）草酸　照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD）测定；

色谱条件与系统适用性试验  用强酸性阳离子交换树脂（H⁺型）为填充剂；磷酸溶液（0.5→1000）为流动相；检测波长为210nm；理论板数按草酸计算应不低于2500；

测定法  精密称取本品适量（约相当于维生素C 100mg），置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取草酸对照品适量，精密称定，加水溶解稀释制成每1ml中约含草酸10μg的溶液，即得；同法测定；按外标法以峰面积计算，不得过维生素C标示量的0.2%；

（2）核黄素磷酸钠有关物质  照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD）测定；

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.054mol/L磷酸二氢钾溶液（15:85）为流动相；检测波长为267nm；取核黄素磷酸钠对照品10mg，置50ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液；量取20μl注入液相色谱仪，调节流速，使核黄素磷酸钠峰的保留时间约为40分钟，各色谱峰出峰顺序如下，核黄素磷酸钠峰与4’-核黄素磷酸钠峰的分离度应大于2.0；

成分相对保留时间3’,4’-核黄素二磷酸酯0.23’,5’-核黄素二磷酸酯0.34’,5’-核黄素二磷酸酯0.53’-核黄素磷酸钠0.74’-核黄素磷酸钠0.9核黄素磷酸钠1核黄素2

测定法  避光操作；取本品适量（约相当于核黄素磷酸钠10mg），精密称定，置50ml量瓶中，加流动相适量，振摇使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取2ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另精密称取核黄素对照品10mg，置50ml量瓶中，加盐酸1ml使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，取该溶液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为核黄素对照品溶液；取核黄素对照品溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分谱峰的峰高约为满量程的50%；再精密量取供试品溶液、对照溶液与核黄素对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪；按外标法，以供试品溶液中3’,4’-核黄素二磷酸酯峰、3’,5’-核黄素二磷酸酯峰及4’,5’-核黄素二磷酸酯峰的峰面积之和计算本品中核黄素二磷酸酯的含量(按核黄素计)不得过6.0%；游离核黄素的含量不得过6.0%；供试品溶液色谱图中除主成分峰、游离核黄素峰和核黄素二磷酸酯峰外，如有其他杂质峰，单个杂质不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(2.0%)，其他杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(4.0%)；

（3）有关物质　照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD）测定；

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷硅胶为填充剂，柱温30℃，检测波长为270nm，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用三乙胺调pH为6.0）为流动相A，乙腈为流动相B，流速为0.8ml/min，按下列程序进行梯度洗脱：

理论板数按维生素C计算应不低于2000；

测定法  避光操作；精密称取本品适量（约相当于维生素B₁ 5mg），置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为自身对照溶液；取糠醛对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含糠醛1.5μg的溶液，作为对照品溶液；精密量取自身对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使维生素C的峰高为满量程的25％～50％，再精密量取供试品溶液与对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；供试品溶液色谱图中如有与糠醛保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过维生素C标示量的0.15%；杂质峰面积的和（空白溶剂峰除外），不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0%)。