[发明专利]一种恩诺沙星脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种恩诺沙星脂质体的制备方法，属于制药技术领域。

背景技术

恩诺沙星化学名称为1-环丙基-6-氟-4-氧代-1，4-二氢-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸，具有广谱、高效、低残留、低毒、药代动力学特征好、作用机制独特、半衰期长、组织分布广等优点。在临床应用范围比较广泛，包括鸡支原体、禽大肠杆菌、鸡白痢、多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、嗜血杆菌、金黄葡萄球菌等，在临床上常见到是混合感染，应用恩诺沙星可以一举多效；猪大肠杆菌、霉形体性、多杀性巴氏杆菌、猪丹毒、布氏杆菌、链球菌、乳腺炎、子宫炎等临床上应用治疗效果明显；针对于牛、羊的大肠杆菌、霉形体肺炎、炭疽、李氏杆菌、乳房炎、子宫炎等应用注射液肌注可以完全治愈；犬、兔消化道、呼吸道、泌尿系统、生殖器官感染、外耳炎、心内膜炎、绿脓杆菌、骨髓炎等用恩诺沙星可以治疗。

恩诺沙星在动物机体内可以代谢成环丙沙星，同样是一种药效性较好的抗菌素，因此通过这种方法将恩诺沙星制成脂质体，脂质体是一种靶向药物载体，可以将药物包封在直径为亚微米或纳米的脂质体从而延长有效作用时间，提高生物利用度，减少临床用药次数，提高治愈率，增创经济效益。目前的恩诺沙星脂质体的包封率和治愈率还有待提高。

发明内容

本发明的目的是提供一种恩诺沙星脂质体的制备方法，以延长药物的有效作用和半衰期、提高生物利用度。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种恩诺沙星脂质体的制备方法，其步骤如下：

1)取2.5重量份恩诺沙星加入到pH为6.8-7.2的缓冲液中充分溶解，制成浓度为2.5mg/mL的水相，备用；取大豆卵磷脂3～5重量份、胆固醇1重量份、0.3-0.5重量份吐温-80，采用氯仿混合溶解充分得到油相，备用；

2)将油相减压蒸馏除溶剂得到空白磷脂膜，对空白磷脂膜采用硫酸铵溶液冲洗、水化得到空白脂质体，经过滤膜过滤处理，备用；

3)将步骤2)得到的空白脂质体放入透析袋中，利用生理盐水于37℃恒温透析5-7小时，然后将透析后的空白脂质体加入到水相中加热至45-55℃，孵化15-25分钟，得到恩诺沙星脂质体粗品；

4)将步骤3)得到的粗品进行离心处理，将离心后的沉淀物冻干得到恩诺沙星脂质体。

步骤1)所述缓冲溶液为PBS缓冲溶液。

步骤1)氯仿混合溶解采用超声波细胞破碎仪辅助处理。

步骤2)所述硫酸铵溶液的浓度为300mmol/L。

步骤2)所述的滤膜为0.45微米滤膜。

步骤3)所述透析袋的截留分子量为600Da。

步骤4)离心处理条件为：4℃、15000转/分钟离心40分钟。

所述步骤4)采用如下方法替代：将步骤3)得到的粗品进行离心处理，向离心后的沉淀物中加入PBS缓冲溶液得到溶液型恩诺沙星脂质体，其中恩诺沙星脂质体的浓度为2.0mg/mL。

本发明恩诺沙星脂质体的制备方法简单可行，所需设施简单，原料易取，在实际生产中容易实施。恩诺沙星作用在临床得到广泛的认可，抗菌谱广、组织分布广、针对于细菌性疾病效果良好，本发明通过将恩诺沙星制成脂质体的形式，不仅提高生物利用度，延长半衰期，脂质体形式安全可靠、无毒副作用、生理生化性质稳定等优点，可以在临床上广泛应用。本发明制备得到的溶液型恩诺沙星脂质体，经过无菌处理之后在4℃保存，而采用冻干处理的冻干型恩诺沙星脂质体可以在常温下保存。

具体实施方式

实施例1

本实施例的恩诺沙星脂质体的制备方法采用如下步骤：

1)水相的制备：取2.5g精制恩诺沙星原粉，加入到pH7.2的PBS缓冲液中充分溶解，制成浓度为2.5mg/mL的水相，备用；油相的制备：取大豆卵磷脂3g、胆固醇1g、0.3g吐温-80、氯仿适量混合溶解，经过常温超声波细胞破碎仪短时间作用，作用时间3s，间隔时间3s，使其充分溶解，得到油相；

2)将油相经过水温60℃旋转减压蒸发作用15min制得空白磷脂膜，然后向空白磷脂膜加入300mmol/L硫酸铵溶液充分冲洗，水化得到空白脂质体，经0.45微米滤膜过滤处理，备用；

3)将上述步骤中的空白脂质体放入透析袋中，利用生理盐水(0.85％)于37℃恒温透析5h，然后将透析后的空白脂质体加入到水相中，加热至45℃孵化15min，即制成恩诺沙星脂质体粗品；