[发明专利]充质干细胞及其提取方法在制备银屑病的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及充质干细胞在制备免疫调节功能药物中的应用，特别是皮肤间充质干细胞（Skin-derived Mesenchymal Stem Cells）在制备治疗银屑病的药物中的应用。

 

背景技术

银屑病（psoriasis）是一种常见的免疫相关性、复发性的皮肤慢性炎症，其特征是真皮内浓密的以T细胞、DC、自然杀伤T细胞和巨噬细胞为主的炎性细胞浸润。银屑病患者皮肤的表皮过度增生且无法正常分化，使其表皮显著增厚、结痂增多(Nestle et al., 2009)。银屑病的确切发病原因还不清楚，环境因子（诸如感染、外伤、压力等）和遗传因子等综合因素决定了个体的易感性。银屑病目前尚无根治的药物(Nestle et al., 2009)，早期治疗多使用类固醇等非生物性的免疫抑制剂，此类非专一性免疫抑制剂具有相当程度的副作用。近年来，生物制剂如肿瘤坏死因子制剂Etanercept（依那西普）等也被用于银屑病治疗，此类药物多为人源化抗体，用于阻隔银屑病相关炎症细胞因子与受体间的作用。由于许多炎症细胞因子在机体正常免疫反应中不可缺少，没有选择性地阻挡炎症细胞因子亦会导致用药后的副作用，停药后疾病容易反弹。此外，抗体类药物生产成本高、价格昂贵、普通病人很难能承受。我国从1984年以来我国约有超过400万患者被诊断为银屑病，自主研究开发我国有知识产权的治疗银屑病的新药物势在必行。

充质干细胞（mesenchymal stem cell）是一种未分化、能自我增生、且能分化成多种间充质组织细胞的多能性细胞(Nestle et al., 2009)。早期，间充质干细胞多从骨髓中取得，骨髓间充质干细胞具有抑制免疫应答和诱导外周免疫耐受的特质(Nestle et al., 2009)，曾被应用于抑制骨髓移植时所导致的移植体对宿主排斥反应（graft-versus-host disease, GVHD）(Nestle et al., 2009)。除了骨髓以外，间充质干细胞也存在于其他成体组织中。不同于骨髓间充质干细胞，在皮肤真皮层中的间充质干细胞，除了能分化成中胚层（mesodermal）相关组织细胞（如脂肪细胞、平滑肌细胞），还具有分化成神经细胞、造血细胞、肝细胞等多种非中胚层组织细胞的特性，因此在临床上有极大的应用价值(Nestle et al., 2009)。由于大量的皮肤样本较骨髓易于取得，从皮肤样本提取治疗用间充质干细胞实属可行性高、用途广、侵入性小、且具经济效益的选择。然而，皮肤间充质干细胞的免疫调节功能目前尚未被发现，本发明将就此问题进行研究。

 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种充质干细胞在制备具有免疫调节功能的药物中的应用，以及相关充质干细胞的提取方法：

充质干细胞在制备治疗具有免疫调节功能的药物中的应用。

充质干细胞在制备治疗银屑病的药物中的应用。

所述的充质干细胞在制备治疗具有免疫调节功能的药物中的应用，其中所述的充质干细胞来源于皮肤真皮层中。

所述的充质干细胞在制备治疗银屑病的药物中的应用，其中所述的充质干细胞来源于皮肤真皮层中。

所述的应用中所述的充质干细胞通过下列方法提取：剪取背部皮肤置于dispase酶中,消化过夜后清洗，剥去表皮，将真皮置于胶原酶中消化，消化完成后再添加DNase I消化，用PBS洗一遍，用滴管吹打成单细胞悬液，过滤后接种于培养皿中，培养后，弃去悬浮细胞，将贴壁细胞继续培养，待长满瓶底大部分后，胰酶消化，常规传代。