[发明专利]液体植酸酶稳定性的测定方法

权利要求书

1.一种液体植酸酶稳定性的测定方法，该方法包括：

1)将液体植酸酶在6℃～60℃的温度震荡处理10分钟～120小时；

2)在步骤1)的处理过程中选取至少一个时间点测定该液体植酸酶震荡前后的吸光度和酶活；

3)根据步骤2)中的吸光度的变化评价澄清度的稳定性，以及根据步骤2)中酶活的变化评价酶活活性的稳定性。

2.根据权利要求1所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，步骤1)中，所述温度为30～45℃，所述震荡处理的时间为30分钟～24小时，以及所述震荡处理的强度为100～300次/分钟。

3.根据权利要求1所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，步骤1)中，所述温度为37℃或45℃，所述时间为24小时或1小时，并且震荡处理的强度为200次/分钟。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，所述时间点为震荡处理时间。

5.根据权利要求1所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，步骤2)中，在546nm下使用分光光度计测定该液体植酸酶震荡前后的吸光度；以及按照GB/T18634-2009方法测定该液体植酸酶的酶活。

6.根据权利要求1所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，步骤3)中，所述酶活的变化可为下列公式(1)表示的酶活存留率：

酶活存留率＝存留酶活/初始酶活×100％        (1)，

其中，存留酶活为震荡处理后的酶活，初始酶活为震荡处理前的酶活。

7.根据权利要求1所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，步骤3)中，所述吸光度的变化可为下列公式(2)表示的吸光度变化率：

吸光度变化率＝震荡后吸光度值/初始吸光度值×100％      (2)，

其中，初始吸光度值为震荡处理前的吸光度值。

8.一种液体植酸酶稳定性的测定方法，该方法包括以下步骤：

1)根据液体植酸酶运输、储存、使用环境温度等实际情况，将恒温振荡器设定温度为6℃～60℃，震荡处理时间设定为10分钟～120小时，在震荡处理的时间范围内选取至少一个时间点，恒温振荡器转速设定为100～300转/分钟；

2)将待测液体植酸酶摇匀后，等分到m个具塞玻璃瓶中，塞紧瓶口，备用，其中，m为大于或等于2的整数；

3)调节恒温振荡器至上述温度和速度，待恒温恒速后，同时放入上述准备好的m个具塞玻璃瓶，放入后立即开始计时，震荡到待测时间点后取出具塞玻璃瓶，将液体植酸酶充分混匀，测定植酸酶的活性和546nm下相对于蒸馏水的吸光值，记录结果；剩余的m个未震荡液体植酸酶同时测定植酸酶的活性和546nm下相对于蒸馏水的吸光值，作为震荡前的初始对照；

4)根据步骤3)中的数据计算酶活存留率和吸光度变化率，其中，

该时间点震荡的m个样品的酶活测定结果取算术平均值为该温度点存留酶活，未震荡的m个样品酶活测定结果平均值作为初始酶活，

该时间点的酶活存留率＝存留酶活/初始酶活×100％，其中，存留酶活为震荡处理后的酶活，初始酶活为震荡处理前的酶活，

该时间点震荡的m个样品的吸光度测定结果取算术平均值为该温度点震荡后吸光度值，未震荡的m个样品吸光度测定结果平均值作为初始吸光度值，

该时间点的吸光度变化率＝震荡后吸光度值/初始吸光度值×100％，其中，初始吸光度值为震荡处理前的吸光度值。

9.根据权利要求8所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，步骤1)中，将恒温振荡器设定温度为37℃或45℃，震荡处理时间设定30分钟，恒温振荡器转速设定为200转/分钟。

10.根据权利要求8所述的液体植酸酶稳定性的测定方法，其中，在546nm下使用分光光度计测定该液体植酸酶震荡前后的吸光度，以及按照GB/T18634-2009方法测定植酸酶的活性。