[发明专利]嗜水气单胞菌适体及其筛选方法与应用有效
申请号: | 201210001777.0 | 申请日: | 2012-01-05 |
公开(公告)号: | CN102643821A | 公开(公告)日: | 2012-08-22 |
发明(设计)人: | 李元跃;王雷;段博文;陈融斌;黎中宝 | 申请(专利权)人: | 集美大学 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/68;C12R1/01 |
代理公司: | 厦门市诚得知识产权代理事务所 35209 | 代理人: | 方惠春 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水气 单胞菌适体 及其 筛选 方法 应用 | ||
1.嗜水气单胞菌适体,其特征在于,其序列如序列表中1-22号所示。
2.如权利要求1所述嗜水气单胞菌适体的筛选方法,其特征在于,所述筛选方法采用SELEX 筛选,所述SELEX 筛选的步骤包括:
1)构建并合成待筛选的嗜水气单胞菌适体ssDNA文库,并设计合成相应的引物;
2)取适量所述ssDNA文库与嗜水气单胞菌进行结合;
3)分离获得与嗜水气单胞菌结合的ssDNA,以该ssDNA为模板进行PCT扩增,扩增产物再次进行SELEX 筛选直至获得如权利要求1所述的适体。
3.如权利要求2所述嗜水气单胞菌适体的筛选方法,其特征在于在步骤1)中,所述ssDNA文库为::5′-GGG AGC TCA GAA TAA ACG CTC AA-N35-TT CGA CAT GAG GCC CGG ATC-3′。
4.如权利要求2所述嗜水气单胞菌适体的筛选方法,其特征在于在步骤1)中,所述引物为:
引物Ⅰ:5′-GGG AGC TCA GAA TAA ACG CTC AA-3′;
引物Ⅱ:5′-GAT CCG GGC CTC ATG TCG AA-3′;
引物Ⅲ:5′-地高辛-GGG AGC TCA GAA TAA ACG CTC AA-3′;
引物Ⅳ:5′-生物素-GAT CCG GGC CTC ATG TCG AA-3′。
5.如权利要求2所述嗜水气单胞菌适体的筛选方法,其特征在于在步骤3)中,所述SELEX 筛选共进行12轮。
6.如权利要求1所述嗜水气单胞菌适体在检测述嗜水气单胞菌中的应用。
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