[发明专利]通过双溶剂法提取蛋白质

权利要求书

1.一种从完整藻类细胞分离蛋白质的方法，其包括：

提供包含完整藻类细胞的湿藻类生物质，所述完整藻类细胞包含水、藻类蛋白质和极性脂质；

通过去除胞外水而使所述湿藻类生物质脱水以将所述湿藻类生物质的固体含量增加至5%至50%之间，从而产生部分脱水的藻类生物质；

将所述部分脱水的湿藻类生物质与两亲性溶剂组和疏水性溶剂组混合以产生包含较重相和较轻相的提取混合物，其中所述较重相包含水、两亲性溶剂组、部分脱水的湿藻类生物质和藻类蛋白质，且所述较轻相包含疏水性溶剂组和极性脂质；

将所述提取混合物的较重相与所述提取混合物的较轻相分离；

将所述部分脱水的湿海藻生物质从所述提取混合物的较重相分离以产生包含蛋白质、水和两亲性溶剂组的蛋白质混合物；以及

将所述蛋白质从所述蛋白质混合物中分离以产生蛋白质级分。

2.根据权利要求1所述的方法，其中脱水是通过离心、过滤、沉降或漂浮分级分离进行。

3.根据权利要求1所述的方法，其中在加入疏水性溶剂组之前添加一定量的两亲性溶剂组以将提取混合物的极性指数调节至约6.5至6.7。

4.根据权利要求3所述的方法，其中在加入所述两亲性溶剂组之后添加一定量的疏水性溶剂组以将提取混合物的极性指数调节至约5.7-5.9。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述两亲性溶剂组为丙酮、甲醇、乙醇、异丙醇、丁酮、二甲醚和丙醛、2-丙醇、乙腈、叔丁醇、1-丙醇、水、重水(D₂O)、乙二醇、甘油或其组合。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述疏水性溶剂组为丙烷、丁烷、戊烷、丁烯、丙烯、石脑油、烷烃、己烷、戊烷、庚烷、辛烷、酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮、芳烃、甲苯、苯、环己烷、四氢呋喃、卤代烷烃、氯仿、三氯乙烯、醚、二乙醚、柴油、喷气燃料、汽油及其混合物。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述较重相与所述较轻相通过滗析、膜过滤或离心分离。

8.根据权利要求1所述的方法，其中通过滗析、膜过滤或离心将所述湿藻类生物质从藻类生物质与两亲性溶剂组、蛋白质和水的混合物中分离。

9.根据权利要求1所述的方法，其中通过蒸发或蒸馏将所述两亲性溶剂组和水从所述蛋白质混合物中去除。

10.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括回收所述两亲性溶剂组。

11.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括浓缩且回收所述两亲性溶剂组。

12.根据权利要求1所述的方法，其中加热所述提取混合物。

13.根据权利要求12所述的方法，其中将所述混合物用微波、水、蒸汽、或热油或电力进行加热。

14.根据权利要求12所述的方法，其中在大气压力下加热所述提取混合物。

15.根据权利要求12所述的方法，其中在加压反应器中加热所述提取混合物。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述加压反应器为分批反应器或连续反应器。

17.一种从完整藻类细胞分离蛋白质的方法，其包括：

提供包含完整藻类细胞的湿藻类生物质，所述完整藻类细胞包含水、藻类蛋白质和极性脂质；

将所述湿藻类生物质与两亲性溶剂组和疏水性溶剂组混合以产生包含较重相和较轻相的提取混合物，其中所述较重相包含水、两亲性溶剂组、湿藻类生物质和藻类蛋白质，且所述较轻相包含疏水性溶剂组和极性脂质；

将所述提取混合物的较重相与所述提取混合物的较轻相分离；

将所述湿藻类生物质从所述提取混合物的较重相分离以产生包含蛋白质、水和两亲性溶剂组的蛋白质混合物；以及

将所述蛋白质从所述蛋白质混合物中分离以产生蛋白质级分。