[发明专利]组织学样品中单个靶标分子的定量

权利要求书

1.一种用于对样品中存在的靶标进行定量的方法，其中所述靶标是固定的，包括

（a）将包括所述靶标的单独单元的群体的样品与一种或多种结合剂孵育，其中

（i）至少一种所述结合剂能够与所述靶标的单个单独单元特异结合；

（ii）至少一种所述结合剂包括酶，并且

（iii）（i）或（ii）的至少一种所述结合剂对其在所述样品中的结合配偶体的结合亲和性是已知的，

从而形成具有所述靶标的单独单个单元的部分子群的一个或多个离散的单个靶标部位，其中各个离散的单个靶标部位包括所述靶标的一个单独单元与一种或多种结合剂的复合物，其中至少一种所述结合剂包括所述酶；

（b）使所述离散的单个靶标部位可视化为视觉上明显的点；

（c）对所述视觉上明显的点进行定量；

（d）评估所述靶标的量。

2.根据权利要求1所述的方法，其中由所述样品中存在的所述靶标的单个单独单元的小部分形成所述靶标部位。

3.根据权利要求1所述的方法，其中由所述样品中存在的所述靶标的单个单独单元的大部分形成所述靶标部位。

4.一种用于对样品中存在的靶标进行定量的方法，其中所述靶标是固定的，包括

（a）将包括所述靶标的单独单元的群体的样品与一种或多种结合剂孵育，其中

（i）至少一种所述结合剂能够与所述靶标的单个单独单元特异结合；并且

（ii）至少一种所述结合剂包括酶，

从而形成具有所述靶标的单独单个单元的预定部分子群的一个或多个离散的单个靶标部位，其中各个离散的单个靶标部位包括所述靶标的一个单独单元与一种或多种结合剂的复合物，其中至少一种结合剂包括所述酶；

（b）使包括所述酶的所述离散的单个靶标部位可视化为视觉上明显的点；

（c）对所述视觉上明显的点进行定量；

（d）评估所述样品中靶标的量。

5.根据权利要求4所述的方法，包括

（a）将所述样品与第一结合剂孵育，

其中

（i）所述第一结合剂能够与所述靶标的单个单独单元特异结合并使所述样品中所有结合位点基本上饱和，

（ii）预定部分的所述第一结合剂包括酶，

从而形成离散的单个靶标部位，各个靶标部位包括所述靶标的单个单独单元和所述结合剂，其中一部分的所述离散的单个靶标部位包括含有酶的所述结合剂；

（b）使包括所述酶的所述离散的单个靶标部位可视化为视觉上明显的点；

（c）对所述视觉上明显的点进行定量；

（d）评估所述样品中靶标的量。

6.根据权利要求4所述的方法，包括

（a）将所述样品与第一和第二结合剂孵育，

其中

（i）第一结合剂能够与所述靶标的单个单独单元特异结合并使所述样品中所有结合位点基本上饱和，且

（ii）第二结合剂能够与所述第一结合剂特异结合，且预定部分的所述第二结合剂包括酶，

从而形成离散的单个靶标部位，各个靶标部位包括所述靶标的单个单独单元、所述第一结合剂和所述第二结合剂，其中一部分的所述离散的单个靶标部位包括含有酶的所述结合剂；

（b）使包括所述酶的所述离散的单个靶标部位可视化为视觉上明显的点；

（c）对所述视觉上明显的点进行定量；

（d）评估所述样品中靶标的量。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中所述结合剂是特异结合对的成员。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的方法，其中所述酶是具有氧化还原酶活性的酶。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述酶具有过氧化物酶活性或酚氧化酶活性。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述酶是辣根过氧化物酶、大豆过氧化物酶或漆酶、或所述酶的功能性类似物。