[发明专利]皮肤穿透及细胞进入(SPACE)肽及其使用方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求以下美国临时专利申请号的优先权：2010年11月9日提交的标题为“Peptides to Facilitate Drug Delivery”(促进药物递送的肽)的61/411,884；2011年8月25日提交的标题为“Skin Permeating and Cell Entering(SPACE)Peptides and Methods of Use Thereof”(皮肤穿透及细胞进入(SPACE)肽及其使用方法)的61/527,574；以及2011年8月26日提交的标题为“Skin Permeating and Cell Entering(SPACE)Peptides and Methods of Use Thereof”(皮肤穿透及细胞进入(SPACE)肽及其使用方法)的61/528,036，这些专利申请全文且出于所有目以引用方式并入本文。

政府权利

本发明根据国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的联邦资助号1UO1 HL080718以及国家资源研究中心(National Center for Research Resources)授予的联邦资助号1S10RR017753-01在政府支持下完成。政府享有本发明的某些权利。

背景

皮肤作为人体最大的器官是许多皮肤疾病的宿主，这些疾病共同地代表了一大类人类健康疾患。因此，将治疗剂例如大分子(例如siRNA)成功地递送至皮肤内已成为活跃研发的课题。然而，实现局部siRNA递送这一目标极具挑战性，除了一些例外已经非常难以实现。主要挑战是大分子的皮肤穿透力差。在人们所提出的增强大分子穿透的多种物理-化学方法中，肽载体已作为潜在的候选物而出现，原因在于它们的易用性、多样性以及靶向皮肤内细胞亚型的潜力。人们已对最初被鉴定为可将药物递送入细胞质的多种肽(包括TAT、多聚精氨酸、爪蟾抗菌肽(meganin)和果蝇穿膜肽(penetratin))进行了跨角质层(SC)的穿透测试，少数已经显示出可将小分子递送入表皮的一定效果。相比之下，只有一种肽TD-1具体表明可穿透SC，并具有增强局部用药的全身吸收的能力。虽然已知多种肽可穿透细胞膜以及少数可穿透SC，但是需要能同时增强跨SC和/或跨活表皮和真皮细胞细胞膜的大分子穿透及其他活动的肽。

发明概述

本公开提供促进递送活性剂或活性剂载体的肽以及肽组合物，其中该组合物能够穿透SC和/或活细胞的细胞膜。

在第一方面，本公开提供包含包括氨基酸序列TGSTQHQ(SEQ ID NO：1)、HSALTKH(SEQ ID NO：2)、KTGSHNQ(SEQ ID NO：3)、MGPSSML(SEQ ID NO：4)、TDPNQLQ(SEQ ID NO：5)或STHFIDT(SEQ ID NO：6)的肽的组合物，其中该肽偶联到活性剂或包含该活性剂的活性剂载体，并且其中该组合物在与角质层(SC)接触时能够穿透角质层或与细胞接触时穿透细胞。

在该第一方面的一个实施方案中，该组合物能够穿透角质层(SC)以及穿透细胞。

在该第一方面的一个实施方案中，该氨基酸序列包括CTGSTQHQC(SEQ ID NO：7)、CHSALTKHC(SEQ ID NO：8)、CKTGSHNQC(SEQ ID NO：9)、CMGPSSMLC(SEQ ID NO：10)、CTDPNQLQC(SEQ ID NO：11)或CSTHFIDTC(SEQ ID NO：12)。

在该第一方面的一个实施方案中，该氨基酸序列包括ACTGSTQHQCG(SEQ ID NO：13)、ACHSALTKHCG(SEQ ID NO：14)、ACKTGSHNQCG(SEQ ID NO：15)、ACMGPSSMLCG(SEQ ID NO：16)、ACTDPNQLQCG(SEQ ID NO：17)或ACSTHFIDTCG(SEQ ID NO：18)。在一个实施方案中，其中该氨基酸序列包括ACTGSTQHQCG(SEQ ID NO：13)、ACHSALTKHCG(SEQ ID NO：14)、ACKTGSHNQCG(SEQ ID NO：15)、ACMGPSSMLCG(SEQ ID NO：16)、ACTDPNQLQCG(SEQ ID NO：17)或ACSTHFIDTCG(SEQ ID NO：18)，该肽为包含Cys-Cys二硫键的环肽。

在该第一方面的一个实施方案中，该组合物能够穿透活非人类动物细胞的细胞膜。