[发明专利]改进的真菌菌株

权利要求书

1.一种真菌细胞，所述真菌细胞已被遗传修饰以减少由所述细胞分泌的内源性纤维二糖脱氢酶活性的量，其中所述真菌细胞来自科毛壳菌科(Chaetomiaceae)，其中所述细胞包含纤维二糖脱氢酶1(cdh1)基因的缺失。

2.如权利要求1所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞是毁丝霉属(Myceliophthora)的物种。

3.如权利要求1或2所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以破坏所述纤维二糖脱氢酶的分泌信号肽。

4.如权利要求1-3中任一项所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以减少由所述细胞表达的内源性纤维二糖脱氢酶的量。

5.如权利要求4所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以破坏编码所述内源性纤维二糖脱氢酶的转录子中的翻译起始序列。

6.如权利要求1-5中任一项所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以将移码突变引入到编码所述内源性纤维二糖脱氢酶的转录子中。

7.如权利要求1-6中任一项所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以减少编码所述内源性纤维二糖脱氢酶的基因的转录水平。

8.如权利要求7所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以破坏编码所述内源性纤维二糖脱氢酶的基因的启动子。

9.如权利要求1-8中任一项所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以至少部分地缺失编码所述内源性纤维二糖脱氢酶的基因。

10.如权利要求1-9中任一项所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞已被遗传修饰以减少所述内源性纤维二糖脱氢酶的催化效力。

11.如权利要求10所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞的所述纤维二糖脱氢酶的活性位点中的一个或多个残基已被遗传修饰。

12.如权利要求1-11中任一项所述的真菌细胞，其中所述真菌细胞的所述纤维二糖脱氢酶的血红素结合结构域中的一个或多个残基已被遗传修饰。

13.如权利要求1-12中任一项所述的真菌细胞，其中所述纤维二糖脱氢酶包含与SEQ ID NO：2至少约85％、约88％、约90％、约93％、约95％、约97％、约98％或约99％相同的氨基酸序列。

14.一种酶混合物，包含两种或更多种纤维素水解性酶，其中所述两种或更多种纤维素水解性酶的至少一种由权利要求1-13中任一项所述的真菌细胞表达。

15.如权利要求14所述的酶混合物，其中所述酶混合物是无细胞混合物。

16.如权利要求14-15中任一项所述的酶混合物，其中所述酶混合物的基质包含预处理的木质纤维素。

17.如权利要求16所述的酶混合物，其中所述预处理的木质纤维素包含通过选自酸预处理、氨预处理、蒸汽爆破和有机溶剂萃取的处理方法处理的木质纤维素。

18.一种用于产生葡萄糖的方法，包括使至少一种纤维素基质与包含两种或更多种纤维素水解性酶的酶混合物接触，其中所述两种或更多种纤维素水解性酶的至少一种由权利要求1-13中任一项所述的真菌细胞表达。

19.一种用于产生葡萄糖的方法，包括使至少一种纤维素基质与权利要求14-17中任一项所述的酶混合物接触。

20.如权利要求18-19中任一项所述的方法，其中所述酶混合物是无细胞混合物。

21.如权利要求18-20中任一项所述的方法，其中所述纤维素基质是预处理的木质纤维素。

22.如权利要求21所述的方法，其中所述预处理的木质纤维素包含通过选自酸预处理、氨预处理、蒸汽爆破和有机溶剂萃取的处理方法处理的木质纤维素。

23.如权利要求18-22中任一项所述的方法，还包括将所述葡萄糖发酵成终产物。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述终产物是燃料醇或前体工业化学品。

25.如权利要求24所述的方法，其中所述燃料醇是乙醇或丁醇。