[发明专利]利用真皮类似物的皮肤弹性增强能力评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种评价皮肤弹性增强效果的方法，该方法是通过制备与实际真皮类似的三维真皮类似物（mimetic dermis），并测量真皮类似物的变形程度的差异实现的。

背景技术

皮肤真皮（dermis）的胶原（collagen）和弹性蛋白（elastin）分别由称为胶原纤维和弹性纤维的蛋白质构成，它们是组成真皮结缔组织的主要成分，是决定皮肤抗拉强度的重要构成成分。健康皮肤中的胶原和成纤维细胞通过相互作用发挥极强的收缩力，从而维持皮肤的紧绷和弹性。但是随着年龄的增加，出现成纤维细胞不健康或者胶原质量下降、两者间的附着点不牢固等情况时，维持皮肤紧绷的力降低，皮肤收缩性降低，失去弹性，从而会成为形成皱纹。

皮肤弹性的核心要素是真皮胶原和成纤维细胞间的相互作用及结合力，目前采用胶原凝胶收缩分析方法（collagen gel contraction assay,Experimental Dermatology,17,788-789（胶原凝胶收缩分析方法，实验皮肤病学，17，788-789））测定胶原与成纤维细胞的相互作用。具体地说是将成纤维细胞和胶原混合制备成凝胶，在普通培养皿中培养后，比较各凝胶的收缩程度，从而观察因物质处理引起的胶原和成纤维细胞相互作用的变化，并利用数字图像（照片）计算各凝胶的表面积，以此评价皮肤弹性度。

但是，此类方法只能显示二维结果，具有以下缺点：不能以三维或更加富有视觉性的方式显示实际皮肤中所发生的变化。

发明内容

本发明要解决的技术问题

本发明人利用培养插入体（culture insert），制备了以三维形态构建的真皮类似物，并确认了通过观察物质处理后上述真皮类似物的构造坍塌程度，可预测实际皮肤中发生的变化，从而完成了本发明。

因此，本发明的目的在于，提供一种能够以三维方式评价皮肤弹性增强效果的方法。

技术方案

为实现上述目的，本发明提供一种利用真皮类似物的皮肤弹性增强能力评价方法。所述方法包括以下步骤：a）使胶原和糖进行反应获得糖化胶原对照组；以及使胶原、糖和需要评价皮肤弹性增强能力的候选物质进行反应获得糖化胶原实验组；使所述对照组和实验组分别与成纤维细胞混合，从而制备凝胶；b）利用培养插入体构建三维形态；c）在所述步骤b）的培养插入体内部分别加入步骤a）中制备的对照组及实验组的凝胶并培养，从而制备真皮类似物；d）将制备的类似物形态以三维方式图像化；及e）根据所述d）的图像化结果评价弹性变化。

并且，本发明提供一种对增强皮肤弹性的化妆品原料进行筛选的方法，所述方法利用所述皮肤弹性增强能力评价方法。

有益效果

本发明利用真皮类似物，可通过三维图像评价因物质处理而引起的真皮类似物坍塌程度，不仅观察因物质处理而引起的成纤维细胞和胶原纤维的结合力及相互作用的变化，还可预测上述变化在实际皮肤中可能引起的变化，能够以富有视觉性的方式显示皮肤弹性降低、下垂等现象。此外，采用本发明的评价方法，还可容易地筛选出能增强皮肤弹性的产品。

附图说明

图1通过HE染色照片示出了本发明的真皮类似物截面图。

图2示出了采用目前胶原凝胶收缩分析方法及依据本发明真皮类似物评价方法时的结果。

图3示出了采用依据本发明的真皮类似物评价皮肤弹性增强功能的结果。

本发明的优选实施方式

本发明涉及一种能够以富有视觉性的方式表现化妆品引起的皮肤弹性增强能力的方法，该方法是利用真皮类似物，以三维方式显示皮肤弹性的变化实现的。

利用本发明的真皮类似物，评价皮肤弹性增强能力的方法包含以下步骤：

a）使胶原和糖进行反应获得糖化胶原对照组；以及使胶原、糖和需要评价皮肤弹性增强能力的候选物质进行反应获得糖化胶原实验组；使所述对照组和实验组分别与成纤维细胞混合，从而制备凝胶；b）利用培养插入体构建三维形态；c）在所述步骤b）的培养插入体内部分别加入步骤a）中制备的对照组及实验组的凝胶并培养，从而制备真皮类似物；d）将制备的类似物形态以三维方式图像化；及e）根据所述d）的图像化结果评价弹性变化。