[发明专利]包含痘苗病毒载体和仙台病毒载体的初免-加强疫苗用病毒载体

说明书

技术领域

本发明涉及初免-加强疫苗用病毒载体，特别是涉及能够用于使细胞免疫和体液免疫的任一个均可激活的初免-加强（prime-boost）疫苗的初免-加强疫苗用病毒载体。

背景技术

人类是暴露于由于病毒、细菌、真菌及其他各种各样的生物的感染以及由其引起的传染病的危险之中的。克服这些传染病的一种方法是接种疫苗。疫苗大致分为使用减毒细菌、病毒等病原微生物本身的活疫苗和使用通过化学处理等死去的病原微生物或者表现抗原性的其一部分的灭活疫苗。

从赋予强的免疫力这点而言，期望疫苗能够激活细胞免疫和体液免疫两方，活疫苗能够激活该两方而在获得免疫力强、免疫持续时间也长等方面是有效的，但由于作为减毒病原的病原微生物本身被给予生物体，难以完全消除由病原微生物的感染引起的副反应、由于减毒病原微生物的回复（reversion）而强毒化（回复突变或者返祖）等隐患。

因此，对于像人类免疫缺陷病毒（HIV）、人类肝炎病毒（HCV）等那样，一旦感染则会患上极为严重的疾病那种病原微生物，利用灭活疫苗，特别是在对人类安全性高的感染性病毒的基因组中，通过基因重组方法重组编码来自病原微生物的抗原蛋白质的基因的病毒载体疫苗。

对于这种病毒载体疫苗，必须为具备对生物体的高度安全性与重组基因的高表达性的病毒载体。作为这样的病毒载体，利用具有在哺乳动物中不能增殖性质的病毒、改变基因组使其虽然感染但在宿主中不产生子代病毒的病毒等，具体地，已利用金丝雀痘病毒、痘苗病毒MVA（Modified Vaccinia virus Ankara）、痘苗病毒LC16m8株、痘苗病毒LC16m8株的B5R基因缺失而不产生具有正常功能的B5R基因产物的痘苗病毒m8ΔB5R株（专利文献1）、载体亚型5的E1基因和E3基因缺失的腺病毒、仙台病毒等。

另外，作为病毒载体疫苗，除了以痘苗病毒LC16m8株为载体的人类乙型肝炎疫苗（非专利文献1）以外，正在多方开发在痘苗病毒LC16m8株中重组有HIV包膜蛋白质gp160（GenBank编号U21135）的HIV疫苗（专利文献2）、在仙台病毒载体中重组有HIV的gag蛋白质的HIV疫苗（专利文献3）等各种在病毒载体（腺病毒载体、仙台病毒载体（sendal virus vector）、痘苗病毒载体（vaccinia virus vector）、金丝雀痘病毒载体等）中重组有HIV-l的组成蛋白质基因的HIV疫苗。

主流正在从一种免疫方法仅使用一种疫苗的方法，向使用组合两种以上的疫苗的初免-加强疫苗的方法转变。作为初免-加强疫苗，除了大量正在尝试的组合重组有抗原蛋白质基因的质粒（DNA疫苗）与各种病毒载体的初免-加强疫苗以外，正在开发用在安全性高的BCG中插入有HIV-l的gag基因的rBCG/HIV-l gag E疫苗进行初免、用在作为在人类体内不增殖的弱毒痘苗病毒的痘苗病毒DIs株中插入有HIV-1的gag蛋白质基因的痘苗DIs/HIV-1gag E疫苗进行加强的初免-加强HIV疫苗（专利文献4）、组合金丝雀痘病毒载体与HIV包膜蛋白质gp120的初免-加强HIV疫苗（非专利文献2）。

另一方面，由于活化CD4阳性T细胞、活化CD8阳性T细胞等免疫细胞表达的CD40配体（CD40L）是使树突状细胞活化的因子，因此有报道用其激活免疫的方法，还报道了给予可溶性CD40L蛋白质而激活免疫的方法，使用导入CD40L表达载体而活化的树突状细胞的恶性肿瘤的免疫疗法，将可溶性CD40L蛋白质和质粒、非增殖性痘苗病毒载体混合给予而激活免疫的方法（非专利文献3），使CD40配体（CD40L）、以及其非切断型突变体CD40Lm在重组细胞中表达从而改变该细胞的免疫反应性的方法（专利文献5）等。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2005/054451号

专利文献2：日本特开2003-321391号

专利文献3：国际公开第2001/072340号

专利文献4：日本特开2006-149234号

专利文献5：国际公开第2005/100558号

非专利文献

非专利文献1：桥爪壮，新的弱毒痘菌株LC16m8株的基础，临床与病毒，第3卷，第3号，第229页，1975年

非专利文献2：Perks-Ngarm S.等，N.Engl.J.Med.，第361卷，第2209-2220页，2009年

非专利文献3：C.E.Gomez等，Vaccine，第27卷，第3165-3174页，2009年