[发明专利]纯化多肽的方法

权利要求书

1.用于从包含多肽和至少一种污染物的组合物纯化多肽的方法，其中，所述方法包括(i)或(ii)：

(i)(a)按高于约150g/L阳离子交换材料的加样密度将所述组合物加样至阳离子交换材料上和(b)将从所述阳离子交换材料回收的组合物加样至混合型材料上的顺次步骤；或

(ii)(a)将所述组合物加样至混合型材料上和(b)按高于约150g/L阳离子交换材料的加样密度将从混合型材料回收的组合物加样至阳离子交换材料上的顺次步骤。

2.权利要求1的方法，其中所述多肽具有约6和约10之间的pI。

3.权利要求2的方法，其中所述多肽具有约7和约9之间的pI。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述多肽是抗体或免疫黏附素。

5.权利要求4的方法，其中所述多肽是免疫黏附素。

6.权利要求4的方法，其中所述多肽是抗体。

7.权利要求6的方法，其中所述抗体是单克隆抗体。

8.权利要求7的方法，其中所述单克隆抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。

9.权利要求7的方法，其中所述单克隆抗体是IgG单克隆抗体。

10.权利要求6的方法，其中所述抗体是抗原结合片段。

11.权利要求10的方法，其中所述抗原结合片段选自Fab片段、Fab’片段、F(ab’)₂片段、scFv、Fv和双抗体。

12.权利要求1-11中任一项的方法，其中所述至少一种污染物是中国仓鼠卵巢蛋白质(CHOP)、浸出的A蛋白、DNA、聚集蛋白质、细胞培养基成分、庆大霉素和病毒污染物中的任意一种或多种。

13.前述权利要求中任一项的方法，其中(i)和/或(ii)中的顺次步骤是连续的。

14.权利要求1-13中任一项的方法，其中所述方法是(i)。

15.权利要求1-13中任一项的方法，其中所述方法是(ii)。

16.权利要求1-15中任一项的方法，其中所述加样密度在约150g/L和约2000g/L阳离子交换材料之间。

17.权利要求16的方法，其中所述密度在约500g/L和约1000g/L阳离子交换材料之间。

18.权利要求1-17中任一项的方法，其中所述阳离子交换材料包含羧酸官能团或磺酸官能团。

19.权利要求18的方法，其中所述官能团是磺丙基、磺乙基、磺异丁基或羧基。

20.权利要求1-19中任一项的方法，其中所述阳离子交换材料是膜、monolith或树脂颗粒。

21.权利要求20的方法，其中所述阳离子交换材料是树脂。

22.权利要求1-17中任一项的方法，其中所述阳离子交换材料是Mustang S、Sartobind S、SO3 Monolith、S Ceramic HyperD、Poros HS50、Poros HS20、磺丙基-Sepharose Fast Flow(SPSFF)、SP-Sepharose XL(SPXL)、CM Sepharose Fast Flow、Capto S、Fractogel Se HiCap、Fractogel SO3或Fractogel COO。

23.权利要求1-22中任一项的方法，其中所述混合型材料包含能够进行阴离子交换和疏水作用的官能团。

24.权利要求23的方法，其中所述混合型材料是Capto-Adhere树脂、MEP HyperCel树脂、HEA HyperCel树脂、PPA HyperCel树脂或ChromaSorb膜。

25.权利要求1-24中任一项的方法，其中所述方法包括随同所述阳离子交换材料和/或混合型材料使用平衡缓冲液、洗涤缓冲液和/或加样缓冲液，且所述平衡缓冲液、洗涤缓冲液和/或加样缓冲液的电导率在约2mS/cm至约25mS/cm之间。