[发明专利]转化生长因子-β1(TGF-β1)抑制剂肽治疗角膜纤维化和/或角膜浑浊的应用

说明书

技术领域

本发明大体上涉及预防和/或治疗角膜纤维化和/或角膜浑浊的产品、组合物和方法。本发明的方法包括使用转化生长因子-β1(TGF-β1)抑制剂肽或编码所述肽的多核苷酸。

技术背景

眼表面，即，角膜，由分层的上皮和底层结缔组织覆盖。其作为眼结构的外层，阻止化学组分、微生物侵袭或机械性创伤的外界刺激的干扰。角膜无血管、透明且正常弯曲，这对于适当的光线折射是必要的，因此，对视力也是必要的。

角膜浑浊是正常清晰的眼睛前表面的模糊，且其发展被认为是属于角膜先天伤口愈合机制的副作用。一旦组织被损伤，间充质细胞和渗透的炎症细胞（即，巨噬细胞）分泌各种生长因子/细胞因子，包括转化生长因子-TGF-β1(TGF-β1)，TGF-β1是最重要的致纤维生长因子之一。尽管TGF-β1对于维持组织完整是至关重要的，但它也促进了愈合上皮下组织的纤维增生反应。

角膜组织修复所涉及的主要成分与皮肤修复所涉及的主要成分极其相似；分层的上皮和位于其下面的含有间充质细胞(角膜成纤维细胞)的胶原基质。I、III和V型胶原纤维和纤维之间的蛋白聚糖的有序的细胞外基质结构对于维持角膜透明度和常规形状是必要的。角膜纤维化导致透明度损失、组织收缩及疤痕转变，因此导致角膜浑浊。

目前，治疗角膜浑浊广泛使用局部消炎类固醇药物（诸如地塞米松、氟米龙或强的松龙）和抗代谢物（诸如丝裂霉素C）。然而这些药物可能伴有严重的并发症。使用局部类固醇可能导致眼压升高，导致视神经损伤和视野改变。使用丝裂霉素C是因为其能阻止某些类型细胞的增殖或增长，例如那些在眼内产生疤痕或浑浊的细胞；然而，在某些环境下丝裂霉素C具有非常强大且潜在的毒性。使用丝裂霉素C后，据报道会出现一些眼相关并发症，包括但不限于结膜充血（眼睛发红）、永久干细胞缺乏症、需要角膜移植的角膜或巩膜变薄或穿孔、角膜代偿失调、白内障、视网膜血管闭塞。

TGF-β1已成为角膜和其他组织浑浊和疤痕的重要调节剂。事实上，在成人组织中TGF-β1和TGF-β2表达增加。类似地，添加外源性TGF-β1治疗角膜伤口引起夸张的疤痕和纤维化。使用不同方法的TGF-β1抑制作用已证明可成功地应用于体内或体外，诸如通过使用特异性中和抗体[参见，例如，Jester等，Cornea 1997;16(2):177-87;Moller-Pedersen等，Current Eye Research 1998 Jul.;17(7):736-47;Bühren等，Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.2009February;50(2):634-43]、阻断TGF-β1表达的编码TGF-β1的基因的反义寡核苷酸[Cordeiro等，Gene Therapy 2003;10:59-71]。尽管用抗TGF-β1抗体抑制TGF-β1加速了角膜的上皮重新形成，同时通过角膜细胞减少了基质的细胞再增殖[Carrington等，Invest.Ophthalmol Vis Sci 2006;47:1886-1894]，但是抗体的使用提供了这种细胞因子(TGF-β1)的全部和特定阻断，然而血液中外源性免疫球蛋白的存在和TGF-β1的系统性阻断所产生的影响，促进了某些副作用。此外，随着时间的推移，免疫球蛋白的稳定性不能立即控制这种细胞因子的活性。反义寡核苷酸在基因表达水平抑制TGF-β1的产生，事实上，其可导致所有这种细胞因子参与的过程的重要的反调节。

为防止屈光手术后的浑浊，已提出其他TGF-β1抑制剂，诸如甘露糖-6-磷酸酯[Angunawela & Marshall,J.Cataract.Refract.Surg.2010;36:121-126]。然而，甘露糖-6-磷酸酯在加速分裂的厚皮移植供区愈合的第二阶段临床试验中失败了，未提供临床抗肝纤维化疗效的证据。

US 6,399,107公开了使用粘多糖合成的抑制剂治疗角膜浑浊。US2004/0001821公开了使用纤溶酶原激活剂防止激光视力矫正手术后的角膜和上皮下浑浊，但未报道角膜浑浊改善的临床数据。

尽管有不同的方法预防和/或治疗角膜纤维化和/或角膜浑浊，然而，本领域仍需要开发新的治疗方法减少角膜纤维化和/或角膜浑浊，最小化或避免副作用。

现在已发现TGF-β1抑制剂肽能够用于预防和/或治疗角膜纤维化和/或角膜浑浊。之前已公开了使用所述肽(WO 2005/019244)和免疫调节剂(WO 2007/048857)治疗肝纤维化。

发明内容