[发明专利]增强免疫应答的疫苗载体和方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2010年1月21日提交的美国临时专利申请No.61/297,098的优先权，其全部并入此处作为参考。

背景技术

疫苗用来引发对抗原，尤其是来自病原体、肿瘤细胞等的抗原的适应性免疫应答，以减轻或防止疾病。合成肽或灭活（killed）或减毒微生物疫苗往往在刺激充分保护性的强大免疫应答方面是有效的。在某些情况下，这些疫苗不是保护性的或只有部分保护性，而其它策略必须用于开发保护性疫苗。基于减毒微生物的疫苗还与基因转移或突变修复的风险有关，并可能给免疫力低下的个体带来风险。需要开发在刺激持久保护性免疫应答方面安全且有效的新疫苗。

流感病毒感染，尤其是禽流感H5N1，呈现出上升的健康及经济关注。证据明确地显示世界越来越多地区，H5N1继续在易感的鸟类及猪之间传播。许多科学家相信，如果不加控制，目前的H5N1禽流感将突变成能够从人到人之间传播而导致世界范围的大流行。由于死亡率（mortality rate）为50%以上，这样的爆发将是灾难性的。不论禽流感病毒H5N1导致人类疾病的能力如何，由于受累地区对禽畜采取消灭措施，该病毒已经对巨大经济影响造成威胁。因此，需要开发疫苗来保护人类、禽类、猪及其它驯养动物免受H5N1流感。能够保护免受H5N1以及其它流感病毒比如H1N1的流感疫苗将是最好的。

发明内容

此处提供刺激免疫应答的疫苗载体和方法，以及降低与流感感染相关的发病率（morbidity）的方法。在一方面中，提供包括抗原多肽和HMGB1多肽或其功能片段的疫苗载体。至少部分抗原多肽和HMGB1多肽存在于疫苗载体的表面上。疫苗载体可能包括编码抗原多肽的第一多核苷酸以及编码HMGB1多肽的第二多核苷酸。HMGB1多肽和抗原多肽可连接于比如融合蛋白中。HMGB1多肽和抗原多肽均可以插入到跨膜蛋白的外环中。

在另一方面中，提供包括疫苗载体和可药用载体的组合物。可药用载体可能是对于口服或经鼻使用可接受的。疫苗载体可能不能复制。

在另一方面中，提供芽孢杆菌（Bacillus spp.）疫苗载体。疫苗载体包括编码表达于疫苗载体表面上的抗原多肽的第一多核苷酸序列以及编码表达于疫苗载体表面上的免疫刺激多肽的第二多核苷酸序列。抗原多肽可能是流感M2e多肽、流感HA多肽或流感NP多肽或其组合。免疫刺激多肽可能是CD154多肽或HMGB1多肽或其组合。免疫刺激多肽和抗原多肽连接于比如融合蛋白中，并可能插入至跨膜蛋白的外环中。

在另一方面中，提供在受试者中增强免疫应答的方法。在方法中，以有效增强受试者对抗原多肽的免疫应答的量向受试者施用此处提供的疫苗载体或组合物。合适地，口服或鼻内施用疫苗载体。

在另一方面中，提供通过施用此处所述的芽孢杆菌疫苗载体在受试者中增强免疫应答的方法。疫苗载体包括编码表达于疫苗载体表面上的抗原多肽的第一多核苷酸序列以及编码表达于疫苗载体表面上的免疫刺激多肽的第二多核苷酸序列。抗原多肽可能是流感M2e多肽、流感HA多肽或流感NP多肽或其组合。免疫刺激多肽可能是CD154多肽、HMGB1多肽或其组合。

在另一方面中，提供降低受试者中流感相关的发病率的方法。在方法中，施用此处公开的疫苗载体或组合物降低与随后流感感染相关的发病率。

附图说明

图1是一个图表，其显示，和用生理盐水接种的鸡相比，通过将指示剂量的表达A型流感表位和HMGB1或CD154的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）疫苗载体对鸡进行灌胃（oral savage）后的M2e特异性抗体生产的ELISA的S/P（样品相对于阳性对照）比。

图2是一个图表，其显示，和用生理盐水接种的鸡相比，通过将指示剂量的表达A型流感表位和HMGB1或CD154的枯草芽孢杆菌疫苗载体对鸡进行灌胃后的HALB特异性抗体生产的ELISA的S/P比。

图3是一个图表，其显示，和用生理盐水接种的鸡相比，通过将指示剂量的表达A型流感表位和HMGB1或CD154的枯草芽孢杆菌疫苗载体对鸡进行灌胃后的HAUA特异性抗体生产的ELISA的S/P比。