[发明专利]一种鉴定抗体敏感性和克隆细胞株的方法及试剂盒

权利要求书

1.一种鉴定抗体敏感性的方法，包括以下步骤：

获取固相载体、细胞和抗体；

所述抗体吸附于所述固相载体；

所述细胞与吸附在所述固相载体的抗体进行孵育，保留所述细胞中与抗体结合的细胞；

对与抗体结合的细胞进行染色和细胞计数；

根据细胞计数结果鉴定所述抗体的敏感性。

2.一种鉴定克隆细胞株的方法，包括以下步骤：

获取固相载体、细胞和克隆细胞株的分泌的抗体；

将所述分泌的抗体吸附所述固相载体；

所述细胞与吸附在所述固相载体的抗体孵育，保留所述细胞中与抗体结合的细胞；

对与抗体结合的细胞进行染色和细胞计数；

根据细胞计数结果鉴定克隆细胞株。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：根据细胞计数结果鉴定所述抗体的敏感性，细胞数量多的抗体敏感性高；根据细胞计数结果鉴定克隆细胞株，细胞数量多的克隆细胞株质量好。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述细胞来自人体或动物体液中的细胞，或者人工培养的原代细胞，或者人工培养的传代细胞。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述人体或动物体液中的细胞选自红细胞、白细胞、血小板，优选白细胞中的淋巴细胞亚群。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述抗体选自单克隆抗体，优选选自抗细胞表面抗原的单克隆抗体，更优选抗淋巴细胞表面抗原的单克隆抗体。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述固相载体选自纤维素载体、交联右旋糖酐载体、聚苯乙烯载体。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述细胞制备成细胞悬浮液，所述细胞悬液的浓度为5-500个细胞/微升，优选10-100个细胞/微升，更优选50-80个细胞/微升。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述细胞与所述抗体在20℃-25℃孵育1小时，优选20-40分钟，更优选20-30分钟。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：吸附时使用包被液与所述抗体混合，所述包被液的pH值为pH6-8，优选9-10，更优选9.5-10。

11.根据权利要求10所述方法，其特征在于：所述包被液的离子浓度为0.01-1mol/L，优选0.01-5mol/L，更优选0.05-0.1mol/L。

12.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：使用染色液对与抗体结合的活细胞进行染色，所述染色液中的染料选自甲基氯、瑞士吉姆萨、沙黄、苏木素中的至少一种。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于：所述甲基氯配制为甲基氯水溶液，浓度为0.05％-5％，优选0.05-1.5％，更优选0.05％-0.5％。

14.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述染色前，先将所述与抗体结合的活细胞固定。

15.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：还包括设置阳性和/或阴性对照，

获取已知敏感性的抗体作为阳性和/或阴性抗体；

所述阳性和/或阴性抗体吸附于固相载体；

所述细胞与吸附在所述固相载体的所述阳性和/或阴性抗体孵育，保留所述细胞中与抗体结合的细胞；

对与抗体结合的细胞进行染色和细胞计数。

16.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述细胞计数为显微镜下进行的细胞计数。

17.一种使用权利要求1或2的方法进行抗体或克隆细胞株鉴定的试剂盒，包括，

固相载体，用于吸附待测抗体或克隆细胞株分泌的抗体；

抗体包被液，用于抗体吸附于所述固相载体；

细胞洗涤液，用于洗涤除去未与抗体结合的细胞；

染色液，用于染色与抗体结合的细胞。

18.根据权利要求17所述的试剂盒，其特征在于：还包括细胞固定液，用于固定与抗体结合的细胞。

19.一种鉴定抗体特异性的方法，包括，

获取固相载体、细胞和抗体，所述细胞包括至少已知两种细胞类型；

所述抗体吸附于所述固相载体；

所述细胞与吸附在固相载体的抗体孵育，保留所述细胞中与抗体结合的细胞；

对与抗体结合的细胞进行染色，并分别进行细胞计数；

通过比较不同已知细胞类型的细胞计数结果，鉴定抗体的特异性。