[发明专利]从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物提取领域，具体涉及从植物马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法。

背景技术

马缨丹(Lantana camara Linn.)，别名五色梅、山大丹、臭牡丹、杀虫花、毛神花、臭草、五色花、穿墙风等，为马鞭草科马缨丹属植物。该植物在我国云南、广西、四川等地分布广泛，资源极为丰富，属于热带、亚热带入侵杂草植物，给当地农牧业生产造成极大危害，对当地生态安全造成极大威胁。

β-榄香烯，拉丁名为β-Elemenum，英文名为β-elemene，化学名为(1S，2S，4R)1-甲基-1-乙烯基-2，4-二异丙烯基环己烷。结构式如下：

β-榄香烯为我国通过“七五”、“八五”、“九五”等一系列国家科技攻关计划项目，是从传统中药中自主研发出的抗肿瘤新药，已应用于临床，并被列入国家基本药物和全国医保用药目录。临床应用表明，β-榄香烯不仅具有很强的杀灭肿瘤细胞和抑制肿瘤生长作用，还可以通过激活免疫系统使机体获得明显的免疫保护效应，具有抗癌谱广、高效、无肝肾损害、无骨髓抑制、副作用少等特点，是人类今后一个时期内治疗肿瘤的首选药物，国内外市场需求量大。目前，β-榄香烯主要依赖于从中药莪术、没药、香茅、一枝黄花中提取，尚未发现有从紫茎泽兰中提取分离得到β-榄香烯的报道。由于中药莪术、没药、香茅、一枝黄花均为中药，成本相对较高，并且其中β-榄香烯的含量不高，提取纯化的成本较高，故造成该药的价格极为昂贵，严重妨碍了该药的推广应用。

本发明的发明人发现马缨丹中β-榄香烯含量和中药莪术、没药、香茅相当，而远高于一枝黄花，但马缨丹为入侵杂草植物，资源丰富，其原料成本远比这些植物低。故本发明欲提供一种从马缨丹中有效提取β-榄香烯的方法，为大幅度降低β-榄香烯的生产成本、以及开发、利用、治理马缨丹这种世界性恶性杂草植物开辟了新的途径。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种从马缨丹中提取分离β-榄香烯的方法。

经发明人检测发现：马缨丹中的β-榄香烯主要分布于其叶和茎中(占总量的90％以上)。其中，以叶中含量最高(约为0.1-0.3％)，而在根、花等其他器官中含量极低或基本没有。并且对比分析结果表明，马缨丹中β-榄香烯含量与中药莪术、没药、香茅相差不大，但远高于一枝黄花的含量。

本发明提取方法中所使用的原料主要为马缨丹的茎、叶中的至少一种或其混合，若原料中混有根、花、果实等其他器官也不会影响提取分离β-榄香烯，但会影响提取方法的收率，故优选以马缨丹兰的茎、叶中的至少一种或其混合为原料。

本发明提取方法如下：

A、原料准备：以马缨丹的茎、叶中的至少一种或其混合为原料，鲜品打浆或干燥粉碎；

B、提取挥发油：从步骤A所得原料中得到挥发油；

C、柱层析：将步骤B得到的挥发油进行柱层析，收集洗脱液，除去洗脱液中的溶剂，得到β-榄香烯粗品。

进一步的，还可以将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品进行进一步精制，得到纯度更高的β-榄香烯精制品。

即精制步骤D为：将步骤B得到的挥发油或步骤C得到的β-榄香烯粗品，采用分子蒸馏或制备型高效液相色谱系统进行精制获得高纯度的β-榄香烯。

采用上述方法处理马缨丹的茎、叶步骤B提取通常可获得β-榄香烯含量大于20％的挥发油；采用柱层析等方法处理通常可获得β-榄香烯含量大于40％，甚至高达60％的β-榄香烯粗品；最终，进一步精制挥发油或β-榄香烯粗品，依据“目标含量”收集含β-榄香烯的纯化成分，通常可获得β-榄香烯含量大于90％，甚至高达98％的β-榄香烯精制品。

其中，提取挥发油时可采用以下五种方法之一提取挥发油：

方法一：水蒸气蒸馏法：

(1)经步骤A处理的原料进行常压蒸馏，得到馏出液；

(2)在馏出液中加入沸点小于60℃的非极性有机溶剂，萃取，收集上层有机相，除去上层有机相中的有机溶剂，即得挥发油。其中，蒸馏时优选以水为主要溶剂，加入提高提取系统沸点和防止皂化起泡，爆沸的材料。如，加入乙二醇是提高蒸馏恒沸液的温度，加入乙醇是消除蒸馏中产生的皂化起泡现象，加入沸石是防止蒸馏时爆沸。故可利用现有的、已知的、常规的、可预料的、具有上述功用的材料替换乙二醇、乙醇、沸石以达到相同的目的。

方法二：浸渍法：

(1)经步骤A处理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一种或其任意比例混合的有机溶剂浸提、过滤，得浸提液；