[发明专利]一种检测幽门螺杆菌抗体的试剂装置及其方法

说明书

技术领域

本发明申请涉及一种检测幽门螺杆菌抗体的试剂装置及其方法，属于临床免疫学检测技术领域。

背景技术

幽门螺杆菌(HP)是人类胃粘膜内的一种螺旋状的革兰阴性细菌。HP直径约0.85μm，长度约2.9μm，菌体光滑，呈S形，有4～6条鞭毛，易粘附在幽门附近的胃窦部及胃体部的粘膜上，位于胃粘液的深层，不与胃酸直接接触。HP是人类常见的致病菌之一，在人与人之间通过经口途径传播，具有活力的HP在河水中可存活1周，是慢性胃炎消化性溃疡和非溃疡性消化不良的重要致病因素。

幽门螺杆菌受瞩目的原因，是因为它与胃溃疡，十二指肠溃疡，以及胃炎有极为密切的关系。它在人体中只能寄居在胃黏膜的上皮，绝大多数的感染只造成无症状的慢性胃炎，只有少数毒性较强的菌株会产生胃溃疡或十二指肠溃疡。新近的研究表明，几乎全部的十二指肠溃疡(95～100％)以及人多数的胃溃疡(70～80％)都与幽门螺杆菌有关。幽门螺杆菌除了与胃部疾病有关之外，还与肝硬化、胆石症、高血压、冠心病、糖尿病、缺铁性贫血、脑血栓形成、偏头痛、荨麻疹等疾病关系密切。

幽门螺杆菌菌体表面的鞭毛以及分泌的多种抗原组分均可激发宿主的免疫应答而诱导抗体产生，检测血清中特异性抗体可以反映病原体的感染情况。幽门螺杆菌全身性抗体(即血清抗体)主要为IgG和IgA，IgM极为少见。血清抗体可反映机体对幽门螺杆菌的感染及免疫应答能力，检测抗体十分必要。

临床检测幽门螺杆菌抗体的常见方法包括金标法、免疫印迹法、酶联免疫吸附试验的方法，但这些方法都存在着不足之处。

一、金标法

金标法是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，胶体金已经广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

该方法快速、敏感性高，但其特异性差，假阳性率较高，且只能做定性检测，不能定量。

二、免疫印迹法

免疫印迹是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。其不足之处在于：

(1)只能进行定性和半定量分析，无法得出被检物质具体的量。

(2)操作步骤繁琐，试验用时较长。

(3)检测的灵敏度还有待提高。

三、酶联免疫吸附法

酶联免疫吸附法(ELISA)被广泛应用于检测幽门螺杆菌抗体，但该方法也存在着下述的不足之处：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；

(2)定量测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；

(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；

(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；

(5)检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；

(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数×48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10×48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10×48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。

发明内容

本发明专利申请即是针对目前对于幽门螺杆菌抗体的检测中存在的上述不足之处，提供一种能够进行独立单人份检测的试剂装置及其检测方法。

本发明专利申请基于酶联免疫检测的原理来实现幽门螺杆菌抗体的检测，是一种独立的、单人份的、一次性的检验方法；进一步的，本发明申请还提供了与该方法配套的相应的试剂装置，该试剂装置将幽门螺杆菌抗体酶联免疫检测所需要的多种试剂盛装在一个独立的、多孔结构的试剂装置内，通过分步加注移弃完成检测步骤；进一步的，所述的试剂装置还可以通过专用的免疫分析仪进行相应的全自动检测。