[发明专利]新生大鼠嗅球嗅鞘细胞的分组纯化方法无效
| 申请号： | 201110447639.0 | 申请日： | 2011-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN102604893A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 吴卫江 | 申请（专利权）人： | 吴卫江 |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214000 江苏省无*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 新生 大鼠 嗅球嗅鞘 细胞 分组 纯化 方法 | ||
1.一种新生大鼠嗅球嗅鞘细胞(OECs)的纯化过程的分组纯化方法，所述纯化过程包括OECs的取材，OECs的分离，OECs分组纯化，形态学观察以及OECs纯度检测；所述分组纯化方法为将大鼠取材后分为正常对照组、免疫吸附组、化学药物组和差速贴壁组进行纯化步骤；其中，
所述免疫吸附组的纯化方法为：将OECs细胞悬液接种于预先包被p75抗体(1μg/ml，室温下1h)的25cm2玻璃培养瓶内培养15min，去除含未吸附细胞的培养基，用生长培养液洗涤5次，0.125％的胰蛋白酶消化，生长培养液调整细胞浓度为5×105/ml后重新种植于预先包被多聚赖氨酸(50μg/ml，室温下1h)的24孔细胞培养板内，余同他组；
所述化学药物组的纯化方法为：将OECs细胞悬液接种于预先包被多聚赖氨酸(50μg/ml，室温下1h)的24孔细胞培养板内培养3d后加入作用浓度为10μmol/L的阿糖胞苷(Ara2C)以抑制成纤维细胞等分裂迅速的细胞，48h后用培养液间隔15min洗3次，以去除Ara2C，余同他组；以及
所述差速贴壁组的纯化方法为：将OECs细胞悬液接种于无包被处理的25cm2玻璃瓶内培养18h后将悬液细胞液吸出，移入另一个无包被处理的25cm2玻璃培养瓶内培养36h；重新种植于预先包被多聚赖氨酸(50μg/ml，室温下1h)的24孔培养板内培养2天，余同他组。
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