[发明专利]一种杨树愈伤组织诱导方法及诱导培养基

权利要求书

1.一种杨树花药愈伤组织诱导培养基，其特征是，其组成是：H培养基+萘乙酸0.5-1.5mg/L+6-糠氨基嘌呤0.5-1.5mg/L+蔗糖20-40g/L+琼脂4.5-6.5g/L。

2.如权利要求1所述的杨树花药愈伤组织诱导培养基，其特征是，其组成是：H培养基+萘乙酸0.5-1.0mg/L+6-糠氨基嘌呤0.5-1.0mg/L+蔗糖20-40g/L+琼脂4.5-6.5g/L。

3.如权利要求2所述的杨树花药愈伤组织诱导培养基，其特征是，其组成是：H培养基+萘乙酸1.0mg/L+6-糠氨基嘌呤1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L。

4.一种杨树愈伤组织的诱导方法，包括如下步骤：

1)从消毒处理后杨树花序中取出花药，获得无菌花药外植体；

2)将无菌花药接种在权利要求1-3任何一项所述的杨树花药愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养，获得杨树愈伤组织。

5.如权利要求4所述的诱导方法，其特征是步骤2)中所述愈伤组织诱导培养在以下条件下进行：黑暗条件下，培养温度为25±1℃。

6.如权利要求4所述的诱导方法，其特征是步骤1)中所述花药是发育时期为小孢子处于单核靠边期的杨树花药。

7.如权利要求4所述的诱导方法，其特征是所述的杨树是北京杨(Populus beijingensis)。

8.如权利要求4所述的诱导方法，其特征是步骤1)中所述消毒处理包括如下步骤：

1-A)用毛笔轻刷花芽鳞片表面后用无菌水冲洗花芽；

1-B)用酒精浸泡花芽；

1-C)用次氯酸钠溶液对花芽进行表面灭菌，用无菌水冲洗；

1-D)吸干花芽表面水分后从花序取出花药，即得。

9.如权利要求8所述的诱导方法，其特征是步骤1-B)中所述酒精的体积百分比浓度为70.0％。

10.如权利要求8所述的诱导方法，其特征是步骤1-C)中所述次氯酸钠溶液的质量百分比浓度为7.0％。