[发明专利]用于淋巴管识别的上转换纳米材料及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种上转换材料及其制备方法，特别是一种用于淋巴管识别的上转换纳米材料及其制备方法。

背景技术

上转换发光过程是指材料吸收较低能量光子发出较高能量光子的过程。上转换材料是一种在长波长光激发下能发出短波长光的发光材料，掺杂在基质中的稀土离子，可以通过激发态吸收各种能量传递过程被激发至高于泵浦能量的能级而向下跃迁从而发射上转换荧光。上转换材料在激光技术、光纤通讯技术、纤维放大器、显示技术与防伪等方面应用广泛。近年来，用上转换材料作为生物分子荧光标记探针受到了人们的广泛关注。其中，作为上转换材料的、具有受体专一性、高亲和力的配体的选择和修饰尤为重要。

众所周知，淋巴管异常可导致如淋巴水肿和肿瘤转移等严重疾病。但是，随着淋巴管内皮细胞特异性标志物的发现和淋巴管生成的分子机制的深入研究，使得淋巴管生成的调控在分子水平上取得了很大进步，这为淋巴管生成的靶向诱导与抑制提供了新方向，同时为淋巴管疾病的早期诊断提供了依据。其中，一种重要的淋巴管内皮细胞特异性标志物为淋巴管内皮透明质酸受体-1（lymphatic vessel endothelial HA receptor, LYVE-1）。LYVE-1是具有332个氨基酸残基的Ⅰ型膜蛋白，其配体为透明质酸（HA）。

因此，以HA为配体，制备上转换材料的生物分子荧光标记探针，将对淋巴管疾病具有靶向的诊断和治疗作用。但到目前为止，利用HA为配体，修饰上转换材料未见报道。

发明内容

本发明目的之一在于针对现有技术的不足，提供一种用于淋巴管识别的上转换纳米材料.

本发明的目的之二在于提供该上转换纳米材料的制备方法.

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于淋巴管识别的上转换纳米材料，其特征在于该材料是以1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS为偶联剂，用透明质酸对上转换纳米粒子进行表面修饰；所述的透明质酸和上转换纳米粒子的质量比为：1:5~5:1，透明质酸与偶联剂总量的摩尔比为：1:1~1:4；偶联剂中EDC和NHS的摩尔比为：1:0.5~1:2。

上述的上转换纳米粒子可以为镝、铽掺杂四氟化钇钠NaYF₄:Dy³⁺,Tb³⁺、镱、铒掺杂四氟化钇钠NaYF₄:Yb³⁺,Er³⁺、钆、镱、铒掺杂四氟化钇钠NaYF₄:Gd³⁺,Yb³⁺,Er³⁺、铕掺杂四氟化钆钠NaGdF₄:Eu³⁺、镱、铒掺杂四氟化钆钠NaGdF₄:Yb³⁺,Er³⁺、铕、铽掺杂四氟化钆钠NaGdF₄:Eu³⁺,Tb³⁺或钐、铽掺杂四氟化钆钠NaGdF₄:Dy³⁺,Tb³⁺。

上述的上转换纳米粒子的粒径可以为10~50纳米。

一种制备上述的用于淋巴管识别的上转换纳米材料的方法，其特征在于该方法的具体步骤为：

a、将一定量的HA充分溶解于10 mL缓冲溶液（pH=4-9）中，在搅拌条件下，按比例缓慢加入EDC和NHS，使EDC和NHS的摩尔比为1:0.5~1:2，而HA与EDC和NHS总量的摩尔比为1:1~1:4室温下反应12-48小时，经透析后得溶液A；

b、将上转换纳米粒子溶于柠檬酸溶液中，其中上转换纳米粒子与柠檬酸的摩尔比为1:1~1:6，超声条件下反应2-4小时；经离心、沉淀、洗涤，干燥后，将所得产物再溶于pH=4-9的缓冲溶液中，搅拌下，缓慢加入EDC和NHS，使EDC和NHS的摩尔比为1:0.5~1:2，，而上转换纳米粒子与EDC和NHS总量的摩尔比为1:1~1:4，室温下反应12-48小时，得溶液B。

c、将步骤a所得溶液A缓慢加入步骤b所得溶液B中，在室温条件下，搅拌0.5-2小时；经离心、沉淀、洗涤，干燥后，得最终产物用于淋巴管识别的上转换纳米材料。