[发明专利]一种提取动物组织样品中病原核酸的试剂

权利要求书

1.一种提取动物组织样品中病原核酸的试剂，其特征在于，溶剂是水，溶质是如下终浓度的物质，其包括：异硫氰酸胍4M-6M，柠檬酸钠20mM-25mM，SLS 0.2wt％-0.5wt％。

2.如权利要求1所述的试剂，其特征在于，溶剂是水，溶质是如下终浓度的物质：6M异硫氰酸胍，25mM柠檬酸钠，质量百分比为0.5％的SLS。

3.如权利要求1或2所述的试剂，其特征在于，pH值为7-9。

4.权利要求1或2所述的试剂在提取动物组织样本和/或细胞培养物中DNA和/或RNA的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，用于提取DNA时，所述试剂pH值为8-9，或，用于提取RNA时，所述试剂pH值为7。

6.一种提取动物组织样品中病原核酸的方法，包括如下步骤：

(1)动物组织预处理；

(2)裂解组织样本：在样本中加入权利要求1所述试剂，上下颠倒混匀；

(3)将样品室温放置10-30min后，15-25℃，13000g离心5min，去除未消化的组织及蛋白；

(4)核酸沉淀：将步骤(3)的上清液转移到新管，加入异丙醇，来回颠倒混匀，10000g离心8-10min，弃去上清；加75％乙醇洗涤核酸沉淀，5000g离心3min，倒去上清，室温干燥2-3min；

(5)加入无核酸酶的无菌水溶解核酸沉淀，55℃，放置2min。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的动物组织预处理方法为匀浆或液氮研磨。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)试剂的用量为30-70mg动物组织中加入1mL权利要求1所述试剂。

9.一种提取细胞培养液中病原核酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)加入权利要求1所述的试剂于细胞培养液，添加体积比为5∶1；

(2)将混合液室温放置10-30min后，15-25℃，13000g离心5min，去除杂质；

(3)核酸沉淀：将步骤(2)的上清液转移到新管，加入异丙醇，来回颠倒混匀，10000g离心8-10min，弃去上清；加75％乙醇洗涤核酸沉淀，5000g离心3min，倒去上清，室温干燥2-3min；

(4)加入无核酸酶的无菌水溶解核酸沉淀。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述加入无菌水的量与步骤(2)中所加提取核酸试剂的量相同，55℃放置2min。