[发明专利]复合微生物发酵剂

说明书

技术领域

本发明属于微生物饲料添加剂领域中的菌种及其混合菌发酵剂。 

背景技术：

我国的秸秆资源十分丰富，年产量可达到5.79亿吨。其中，玉米、小麦、和稻草秸秆三大作物秸秆产量达到了4.39亿吨，占整个秸秆产量的75.88％。目前，随着畜牧业的快速发展，加剧了畜牧业对粮食的依赖性，但秸秆用作饲料数量较少，即使用作饲料也因加工利用不当，使得秸秆的利用率及饲料报酬率低。农作物秸秆营养价值低、适口性差、消化率低。如果对其进行合理的加工调剂，可用于饲喂家畜。据报道，秸秆经青贮、氨化等方法调治后，每6kg青贮秸秆或4kg氨化秸秆相当于1kg玉米饲料的营养价值。因此，采用科学的方法对秸秆进行加工调剂，广泛用于畜牧业，具有良好的生态效益社会效益和经济效益。 

近年来在我国推广的氨化饲料，不仅成本高、能耗高，并且存在与农业争肥、污染环境，有些方法对于牲畜还有毒副作用。而饲料清楚技术的研究与应用已有上百年的历史，目前关键的技术在于微生物优良菌株的选育、复合菌种的有效复配和发酵工艺的优化。 

在这些方面，国内外学者均进行了大量的研究工作，但对于综合解决清楚饲料发酵过程中抑制腐败菌、防治二次发酵，有效控制有机酸和降解木质纤维素，降低成本，便于使用等方面仍然存在问题。 

发明内容：

针对目前存在的问题，本发明的目的在于提供一种青储饲料用微生物发酵剂。 

本发明生产用复合微生物发酵剂黑曲霉孢子、鼠李糖乳杆菌CGMCC4430和植物乳杆菌组成。 

复合微生物发酵剂中各菌种活细胞数量范围如下：鼠李糖乳杆菌为(0.1～60.0)*10⁹个/克，植物乳杆菌数量为(0.01～6.0)*10⁹个/克，黑曲霉孢子数量为(1～50)*10⁸个/克。 

将发酵制得黑曲霉孢子、鼠李糖乳杆菌粉、植物乳杆菌粉以质量比例为1∶(0.5-2)∶(0.5-2)混合，以干重计。 

1)黑曲霉孢子的制备工艺为： 

A.斜面培养方法 

试管，121℃，20min灭菌后，摆斜面，冷却，接种。30℃培养到黑色孢子铺满斜面。 

B.K式培养瓶孢子 

取10°Brix麦芽汁加入2％琼脂，装入500mL K式培养瓶，121℃，20min灭菌后，铺斜面冷却。接入孢子悬浮液1mL，保证悬浮液接种于整个培养基表面；侧放入恒温箱，30℃培养到黑色孢子铺满斜面。 

C.固态放大培养 

将K式瓶孢子制成孢子悬浮液，孢子浓度大于1.0×10⁸个/mL。取200kg固态培养基(麸皮140kg、10°Brix麦芽汁60L)，充分混匀后放入浅盘，在121℃下灭菌1小时。待放凉后，接入孢子悬浮液。培养温度控制在30℃，湿度80-90％，每隔10小时翻料一次，培养时间3天；待培养料长满孢子即可结束培养 

干燥粉碎：发酵结束后，将浅盘放在流化床干燥，干燥温度控制在60℃，待物料水分含量将低于10％以下时，用粉碎机将固体培养料进行粉碎，物料粉碎孔径在100目以上。 

2)鼠李糖乳杆菌和植物乳杆菌菌粉的制备工艺为： 

植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌粉状菌粉生产步骤如下：将斜面菌种转接到液体培养基并逐级扩培到要求的体积；将扩培得到的菌液进行离心分离，收集沉淀菌体；向沉淀菌体中加入保护剂并进行稀释；利用干燥设备制备粉状菌剂，复合菌粉混合时可以加入淀粉和糊精实现各菌活菌数的合适比例。最终菌粉产品中各菌种活细胞数量范围如下：鼠李糖乳杆菌为(0.1～60.0)*10⁹个/克，植物乳杆菌数量为(0.01～6.0)*10⁹个/克，黑曲霉孢子数量为(1～50)*10⁸个/克。 

鼠李糖乳杆菌所用培养基如下：斜面培养基(g/L)：20葡萄糖，5酵母粉，10大豆蛋白胨，10牛肉膏，5NaCl，10乙酸钠，2柠檬酸铵，0.2MgSO₄·7H₂O，0.05MnSO₄·7H₂O，15琼脂，pH 6.5。