[发明专利]用连续传代细胞系生产鸡马立克氏病疫苗及方法

权利要求书

1.一种连续传代细胞系生产的马立克氏病疫苗，其特征在于，

每2ml马立克氏病疫苗成品包含以下组分：

Ham′s F12K培养液：1.4～1.7ml；

胎牛血清：         0.2～0.4ml；

DMSO：             0.1～0.2ml；

马立克氏病病毒含量≥6×10⁶PFU，其中，所述的马立克氏病病毒为使用传代细胞系生产获得。

2.根据权利要求1所述的马立克氏病疫苗，其特征在于，所述传代细胞系为鹌鹑肉瘤纤维细胞系QT6。

3.根据权利要求1所述的马立克氏病疫苗，其特征在于，所述马立克氏病病毒为马立克氏病病毒CVI988/Rispens株。

4.根据权利要求1所述的马立克氏病疫苗，其特征在于，所述马立克氏病病毒为血清I型、血清II型或血清III型中的任意一个或多个的组合。

5.根据权利要求1所述的马立克氏病疫苗，其特征在于，所述马立克氏病疫苗为液氮疫苗或冻干疫苗。

6.一种用连续传代细胞系生产马立克氏病疫苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将传代细胞使用细胞分散液进行消化传代，用细胞生长液培养，以形成良好的细胞单层；

2)将马立克氏病病毒在步骤1)获得的形成良好的细胞单层的传代细胞继代，以获得工作种毒；

3)将步骤1)获得的形成良好的细胞单层的传代细胞，弃去细胞生长液，接种含细胞维持液的工作种毒，在37～38℃下培养，以繁殖马立克氏病病毒；

4)当培养至CPE≥80％以上时，沉淀细胞，收获马立克氏病病毒，并配苗分装以获得马立克氏病疫苗。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤4)还包括将获得的马立克氏病疫苗进行降温，至-90℃～-120℃时将疫苗放入液氮中保存，以获得马立克氏病液氮疫苗的过程。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述传代细胞为鹌鹑肉瘤纤维细胞系QT6。

9.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述马立克氏病病毒为马立克氏病病毒CVI988/Rispens株。

10.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述马立克氏病病毒为血清I型、血清II型或血清III型中的任意一个或多个的组合。