[发明专利]一种玻璃酸钠发酵液的前处理方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种玻璃酸钠发酵液的处理方法，特别涉及一种玻璃酸钠发酵液的前处理方法。

背景技术：

玻璃酸(Hyaluronic acid，简称HA)，是由(1→3)-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-葡萄糖-(1→4)-O-β-D-葡糖醛酸双糖重复单位所组成的直链多聚糖，分子式为(C₁₄H₂₁NO₁₁)n，依据组织来源不同，分子量变化范围为2×105～7×106，双糖单位数为300～11000对。不同来源的玻璃酸的结构一致，无种属差异，只存在相对分子量的区别，其结构式为：

商品玻璃酸一般为钠盐形式，为白纤维状或粉末状固体，有较强的吸湿性，溶于水，不溶于有机溶剂。玻璃酸钠的大分子网状结构通过与H₂O形成氢键结合大量的水，在体内具有构成多种基质、调节渗透压、调控大分子物质的转运、在细胞周围形成物理屏障以及调节细胞功能等作用。玻璃酸钠可作为眼科手术辅助用药及变形性膝关节病和肩关节周围炎的辅助治疗，还在组织生成、创伤愈合、肿瘤入侵和调节细胞功能诸方面具有重要的生理功能。

目前国内的医用级玻璃酸钠的生产大多是动物组织提取的生产工艺，原料成本较高，来源受限，且存在动物源性风险。而发酵法生产玻璃酸钠，通过基因技术，能够筛选出不含内毒素和外毒素且高产HA的变异菌株，较组织提取更加安全；发酵液与动物组织比较，组成成分简单，更有利于提取与纯化，制备高纯度HA；能够保证生产原料来源不受限制，且原料成本更加低廉。

在以往的公开的文献中，玻璃酸钠发酵液的处理方式通常是直接用有机溶剂沉淀或是预铺助滤剂进行过滤。使用有机溶剂沉淀的方法，有机溶剂使用量大，成本高，而且有机溶剂的使用、储存都存在安全风险，有机溶剂的排放及处理存在污染的风险；用预铺助滤剂进行过滤的方法，预铺效果较差，助滤剂预铺不均匀，会导致过滤时间长，而且过滤时容易发生堵塞，因此以上两种方法在工业化生产中均有不足。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种玻璃酸钠发酵液的前处理方法，以克服上述玻璃酸钠发酵液处理方法的不足，该方法成本低、安全、有效。

为实现本发明的目的，本发明所采用的技术方案是：

一种玻璃酸钠发酵液的前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将玻璃酸钠发酵液加水稀释至其体积的2～5倍制得悬浊液；

(2)将步骤(1)所得的悬浊液，在搅拌条件下加入硅藻土，搅拌均匀后，通过板框过滤机，循环该步骤至发酵液澄清；

(3)将步骤(2)所得的滤液用滤芯微滤除菌澄清的玻璃酸钠发酵液。

在本发明的一优选实施例中，每100L悬浊液加入硅藻土的量为1～10kg。

在本发明的一优选实施例中，所述滤芯是0.22um。

在本发明的一优选实施例中，板框中硅藻土滤饼的量为0.4～2.0kg/m²。

本发明的玻璃酸钠发酵液的前处理方法中，硅藻土吸附后，通过物理方法的过滤和微滤来达到玻璃酸钠发酵液的除菌目的，其成本低、安全、有效；利用本方法处理的玻璃酸钠发酵液，可基本去除发酵液中菌体，有效减少了核酸和蛋白等杂质的含量，特别适合医药级玻璃酸钠的工业化生产，并且由该方法处理过的玻璃酸钠发酵液的透光率比较高。

具体实施方式：

通过下面具体实施例进一步说明本发明，但它们不是对本发明的限定。

实施例1：

取玻璃酸钠发酵液20L，加纯化水20L进行稀释得玻璃酸钠发酵液悬浊液，在搅拌条件下向玻璃酸钠发酵液悬浊液中加入硅藻土，硅藻土的加入量为每100L玻璃酸钠发酵液悬浊液加入硅藻土5g，搅拌均匀后，通过过滤面积为2m²的板框过滤机，使得板框中硅藻土滤饼的量为1.0kg/m²，循环加入硅藻土吸附和通过板框过滤机过滤至发酵液澄清，再通过0.22um滤芯微滤，获得除菌澄清的玻璃酸钠发酵液。测得过滤时的平均流速为5.4L/min，过滤后发酵液的透光率为91.4％。

实施例2：