[发明专利]一种桑叶多糖降血糖活性组分的制备方法

权利要求书

1.一种桑叶多糖降血糖活性组分的制备方法，其特征在于以鲜桑树叶片为原料，首先摘取鲜桑树叶经干燥、粉碎后过40目筛，称取桑叶粉100 g，用滤纸袋包好置于索氏提取器中，加入400 mL石油醚，升温至80℃后冷凝回流脱脂3小时，取出脱脂所得的桑叶粉，用95%乙醇冲洗3次，每次3分钟，桑叶粉与乙醇的质量比为1∶8，再用去离子水冲洗3次，每次5分钟，桑叶粉与去离子水的质量比为1∶8，然后置于80℃热水中浸提4次，每次45分钟，将浸提液浓缩，用三氯乙酸脱蛋白3次，三氯乙酸在浸提液中浓度为15%，收集上清液，将上清液加入过氧化氢，过氧化氢在上清液中浓度为10%，于55℃脱色30分钟，然后用去离子水透析24小时，浓缩至100 mL，将所得的100 mL浓缩液缓慢加入375 mL 95%乙醇，使乙醇总含量达到75%，于4℃下静置12小时，然后2000转/分钟离心10分钟，收集沉淀物，将所得的沉淀物复溶于100 mL蒸馏水后，通过D101大孔树脂进行洗脱，收集洗脱液，洗脱液经冷冻干燥后得到粉状的桑叶总多糖，专用于治疗糖尿病。

2.根据权利要求1所述的一种桑叶多糖降血糖活性组分制备方法，其特征在于将所得的粉状桑叶多糖溶于蒸馏水，2000转/分钟离心所得的上清液，再通过DEAE-52 (2.6 cm×25 cm)纤维素柱进行初步分离，依次用水、0.05～0.5 mol/L NaCl溶液进行梯度洗脱，采用苯酚-硫酸法跟踪检测洗脱液中多糖含量并分别收集洗脱液，各部分洗脱液用蒸馏水透析48小时，得到3个桑叶多糖单组分，再通过Sephadex G-100柱层析(1.0 cm×60 cm)进一步纯化，采用蒸馏水洗脱，以苯酚-硫酸法跟踪检测，最终得到3个均一桑叶多糖单组分。