[发明专利]钠离子磷酸共转运蛋白及其编码基因和它们的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种钠离子磷酸共转运蛋白，还涉及钠离子磷酸共转运蛋白的编码基因，以及含有钠离子磷酸共转运蛋白基因的重组载体和细胞，以及钠离子磷酸共转运蛋白及其编码基因含有该基因的重组载体及细胞在培育具有耐盐性转基因生物中的应用。

背景技术

钠离子磷酸共转运蛋白(Na/Pi-cotransporter)细胞中负责钠离子和磷酸基团转运的一种跨膜运输蛋白，广泛存在于细菌、人和高等植物的质膜及许多真核生物细胞器的膜中。钠离子磷酸共转运蛋白可以将钠离子和磷酸基团一同转运到细胞内，提高细胞中钠离子和磷酸基团的浓度。其中积累的钠离子可以为钠氢泵发挥活性提供原材料，并且通过钠氢泵的作用排除细胞。因此，通过钠离子磷酸共转运蛋白和钠氢泵的共同作用下从而使细胞实现钠离子的循环，这是生物细胞耐受盐碱的关键因子。而磷酸基团在细胞代谢和信号传导的过程中起着重要的作用。

发明内容

本发明的发明人基于对钠离子磷酸共转运蛋白的分子生物学研究，意外地发现从嗜碱单胞菌(Alkalimonas amylolytica N10，CGMCC NO.0463)中得到了一种钠离子磷酸共转运蛋白及其编码基因，另一方面还提供了含有钠离子磷酸共转运蛋白基因的重组载体和细胞，以及钠离子磷酸共转运蛋白及其编码基因含有该基因的重组载体及细胞在培育具有耐盐性转基因生物中的应用。

本发明提供了一种钠离子磷酸共转运蛋白，其中，该钠离子磷酸共转运蛋白具有SEQ ID No：2所示的氨基酸序列，或者该转运蛋白具有将SEQ ID No：2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加后仍具有钠离子磷酸共转运蛋白活性的氨基酸序列。

本发明还提供了一种编码钠离子磷酸共转运蛋白的基因，其中，该基因具有SEQ ID No：1所示的核苷酸序列，或者该基因具有编码SEQ ID No：2所示的氨基酸序列的核苷酸序列。

另外，本发明还提供了一种重组载体，其中，该重组载体含有本发明提供的编码钠离子磷酸共转运蛋白的基因。

本发明还提供了一种转基因细胞，其中，该转基因细胞含有本发明提供的编码钠离子磷酸共转运蛋白的基因。

本发明还提供了钠离子磷酸共转运蛋白及其编码基因、含有该基因的重组载体及转基因细胞在培育具有耐盐性转基因生物中的应用。

钠离子磷酸共转运蛋白在耐盐植物培育等方面具有重要的应用潜力。通过克隆得到编码钠离子磷酸共转运蛋白的基因，并通过转基因的操作将微生物来源的钠离子磷酸共转运蛋白基因导入到植物细胞中，获得耐盐性提高的转基因植株成为可能。

附图说明

图1显示了重组载体pUC18-Aan10-Napi导入的大肠杆菌K12(pUC18-Aan10-Napi)的耐盐性的测定结果，其中，将重组载体pUC18-Aan10-Napi导入的大肠杆菌K12(pUC18-Aan10-Napi)分别接种到含有0、2％、4％、6％和8％的NaCl的LB液体培养基中(100μg/ml氨苄青霉素)，培养12小时后测定OD₆₀₀，以导入pUC18空载体的大肠杆菌K12为对照(每组三个平行)。

图2显示了重组载体pUC18-Aan10-Napi导入的大肠杆菌K12(pUC18-Aan10-Napi)的耐盐性的测定结果，其中，将重组载体pUC18-Aan10-Napi导入的大肠杆菌K12(pUC18-Aan10-Napi)接种到含有6％NaCl的LB液体培养基中(100μg/ml氨苄青霉素)培养12小时，每隔2个小时取一次样测定OD₆₀₀，以导入pUC18空载体的大肠杆菌K12为对照(每组三个平行)。

具体实施方式

以下本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

本发明提供了一种钠离子磷酸共转运蛋白，其中，该转运蛋白具有SEQ ID No：2所示的氨基酸序列，或者该钠离子磷酸共转运蛋白具有将SEQ ID No：2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加后仍具有钠离子磷酸共转运蛋白活性的氨基酸序列。优选地，所述钠离子磷酸共转运蛋白具有SEQ ID No：2所示的氨基酸序列。