[发明专利]一种含异甘草黄酮醇的抗肿瘤药物及其应用

权利要求书

1.一种含异甘草黄酮醇的抗肿瘤药物，其特征在于以异甘草黄酮醇作为抑制肿瘤生长和转移的主要活性成分，与药学上可接受的辅料、载体组合加工制成混悬型注射剂、片剂、微胶囊剂；其中，异甘草黄酮醇占药物总重量的10%～99%。

2.如权利要求1所述的抗肿瘤药物，其特征在于主要活性成分异甘草黄酮醇的工业制备方法为：以甘草为原料，用醇类进行提取，然后用聚酰胺柱-硅胶柱-葡聚糖凝胶组合色谱进行分离纯化。

3.如权利要求2所述的抗肿瘤药物的主要活性成分异甘草黄酮醇的工业制备方法，其特征在于将分离纯化所得异甘草黄酮醇进行微粉化处理，控制微粉微粒粒径中位值在 ≤100μm。

4.如权利要求2或3所述的抗肿瘤药物的主要活性成分异甘草黄酮醇的工业制备方法，其特征在于具体制备方法如下：

1）提取

取甘草根，干燥粉碎，每次用药材干重4-10倍的极性溶剂在加热状态下提取，提取2-3次，

所述的药材粉碎粒度为80目以下；所述的极性溶剂为醇类或醇水混合溶剂；所述提取过程的加热温度为50-80℃ ；所述的混合溶剂中醇类所占体积比例为60%-95%；

2）脱脂

将上述的提取物浓缩，回收溶剂，得浸膏，加入5-15倍的醇水混合物作分散剂，加入等体积石油醚、乙醚、正己烷、正戊烷或正庚烷进行提取脱脂，提取2-4次；所述醇水混合物为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇与水的混合物，相对体积比例为5-20%；

3）聚酰胺柱分离

将上述脱脂后的醇水相上到聚酰胺柱顶端，采用与上样药液相同浓度的醇水混合溶剂进行洗脱，洗脱至无色，将黄酮苷杂质类成分洗脱去掉，然后用40-60%的醇水混合洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液；所述的柱层析的上样量为2-6倍柱体积，上样流速为3-5倍柱体积/每小时；所述醇水混合物为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇与水的混合物；

4）硅胶柱分离

将上步洗脱液浓缩，回收溶剂，采用硅胶柱进行分离，每次上样量为硅胶重量的1/300-1/50，采用卤代烃与醇组成的混合溶剂洗脱,收集洗脱液，回收溶剂得到黄色洗脱物；所述卤代烃为氯仿或二氯甲烷，所述醇为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇；所述混合溶剂中卤代烃与醇比例为3:1～5:1；

5）葡聚糖凝胶柱分离

葡聚糖凝胶装柱（通常为羟丙基葡聚糖凝胶），径高比10:1,将上步得到黄色洗脱物上柱，采用醇类洗脱，接收第一个色带，回收溶剂，浓缩干燥；所述醇类为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇；

6）微粉化处理，控制异甘草黄酮醇微粉微粒粒径中位值≤100μm。

5.如权利要求2或3所述的抗肿瘤药物的主要活性成分异甘草黄酮醇的工业制备方法，其特征在于具体制备方法如下：

甘草样品5kg，粉碎,10倍量95 %乙醇50℃提取3 次,每次4 h；提取液过滤,减压浓缩回收溶剂，用15倍量20 %的乙醇适量稀释,用石油醚脱脂后，上聚酰胺柱进行分离, 上样量为6BV，上样流速为3BV/h,用20%甲醇洗脱至流出液无色，之后换用40%甲醇洗脱,收集3倍柱体积至6倍柱体积的洗脱液，浓缩去除溶剂后，经硅胶柱层析,氯仿-甲醇(3 :1,v/ v) 进行洗脱，洗脱液再经过Sephadex L H-20凝胶色谱柱进行分离，甲醇洗脱，收集第一个色带，收集洗脱液，浓缩，析晶，微粉化处理，得到微粒粒径中位值≤100μm的异甘草黄酮醇。

6.如权利要求2或3所述的抗肿瘤药物的主要活性成分异甘草黄酮醇的工业制备方法，其特征在于具体制备方法如下：

甘草样品8kg，粉碎,5倍量75% 乙醇80℃提取3 次,每次2 h；提取液过滤,减压浓缩回收溶剂，用5倍量10 %的乙醇适量稀释,用石油醚脱脂后，上聚酰胺柱进行分离, 上样量为4BV，上样流速为4BV/h,用10%甲醇洗脱至流出液无色，之后换用50%甲醇洗脱，收集3倍柱体积至6倍柱体积的洗脱液，浓缩去除溶剂后，经硅胶柱层析,二氯甲烷-乙醇(4:1,v/ v) 进行洗脱，洗脱液再经过Sephadex L H-20凝胶色谱柱进行分离，甲醇洗脱，收集第一个色带，收集洗脱液，浓缩，析晶，微粉化处理，得到微粒粒径中位值≤100μm的异甘草黄酮醇。