[发明专利]链霉菌Streptomyces sp.NK-660及其用于生产ε-聚赖氨酸的发酵培养方法有效
申请号: | 201110362088.8 | 申请日: | 2011-11-16 |
公开(公告)号: | CN102443555A | 公开(公告)日: | 2012-05-09 |
发明(设计)人: | 宋存江;耿伟涛;王淑芳;谢晨庚;王晓萌;冯俊 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/02;C12R1/465 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300071 天津市卫津路*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霉菌 streptomyces sp nk 660 及其 用于 生产 赖氨酸 发酵 培养 方法 | ||
1.链霉菌Streptomyces sp.NK660 CGMCC No.5392。
2.链霉菌Streptomyces sp.NK660 CGMCC No.5392用于生产ε-聚赖氨酸的发酵培养方法,包括如下操作步骤:
(1)将保存于贝纳特斜面上的链霉菌Streptomyces sp.NK660,挑取一环孢子接种在LB培养基中作为种子进行活化培养18-30h;
(2)将种子液以5-10%的接种量接种至以葡萄糖或甘油作为碳源的合成培养基中,通过摇瓶发酵或者30L自动发酵罐进行发酵培养72-96h;
(3)发酵结束后,发酵液6000~10000rpm离心处理10~20min去除菌体,收集上清,利用6M NaOH溶液将上清调整pH=8,过滤祛除沉淀的杂蛋白;
(4)将过滤后的上清置于摇瓶中,利用弱酸型阳离子交换树脂吸附产物,将ε-聚赖氨酸分子吸附在树脂上;弃去吸附过后的上清,蒸馏水洗涤树脂,洗去未吸附的杂质;利用0.4mol/L的稀盐酸洗脱吸附的产物,洗脱液利用NaOH溶液将pH调整到中性;
(5)洗脱液利用冷冻干燥浓缩,浓缩液利用透过量1000Da的透析袋进行处理,去除无机盐离子,透析液冻干后得到ε-聚赖氨酸固体产物;
(6)进行1HNMR和13CNMR图谱分析;MODI-TOF MS测定产物聚合度和分子量。
3.根据权利要求2所述链霉菌Streptomyces sp.NK660 CGMCC No.5392用于生产ε-聚赖氨酸的发酵培养方法,其特征在于,所述弱酸型阳离子交换树脂可以是D113或D151或D152或D110型弱酸型阳离子交换树脂。
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