[发明专利]一种检测β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺的试剂盒及方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测β-内酰胺类和三聚氰胺的试剂盒及方法。 

背景技术

β-内酰胺类药物是医学和兽医学上的一类重要的抗菌药物，应用十分广泛。但由于过敏反应及细菌产生的耐药性等原因，许多国家都对该类药物在动物上的使用及在动物源性食品中的残留进行了严格控制。美国食品和药品监督管理局(FDA)的调查表明：不注意休药期、用药不合理或是使用违禁药物，是导致动物性食品中抗生素残留的主要原因。长期摄入含抗生素的食品，可造成药物积累，当达到一定浓度后，就会对人体的健康带来一系列负面影响，如产生过敏反应、破坏胃肠道菌群平衡和增强细菌耐药性等。更为重要的是，抗生素被过量食入健康人肠道，会破坏健康人的正常菌群环境，导致人体免疫力的降低，从而危害消费者的身体健康，同时也影响牛奶及乳制品的出口贸易。我国的原料乳中β-内酰胺类抗生素残留严重，对其开展监控检测是我国乳品业发展中极为关注的问题。欧盟、美国等多个国家都制定了牛奶、肌肉和肾脏等动物源性食品中该类药物的最高残留限量(MRL)，我国农业部235号文件公告对其MRL也做了严格规定，该类药物在牛奶中的MRL为4～100μg/L，在肌肉、肝脏和肾脏中的MRL为50～1000μg/kg。 

三聚氰胺(melamine)，简称三胺，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物。食品工业中常需要测定食品中的蛋白质含量。由于直接测量蛋白质技术比较复杂，所以常用凯氏定氮法间接确定食品中蛋白质的含量。由于三聚氰胺与蛋白质相比含有更高比例的氮原子，所以三聚氰胺非法添加剂常被一些不法商贩用作食品添加剂，以提升食品检测中的蛋白质含量指标。2008年8月以来，中国一些医院陆续检查到部分婴儿患有胆结石，而这些患有胆结石的婴儿均喝了含有三聚氰胺的奶粉，这是影响全国的“三鹿奶粉”事件。在之后的调查中发现，有些不法商人为获取更高的利润，直接在原料奶中添加三聚氰胺。随后在全国奶粉和液态奶的检测中，发现市场上很大部分产品中均含有三聚氰胺，导致了乳品行业的诚信危机，也给人们的日常生活造成了巨大的负面影响。我国卫生部等五部门联合发布公告，规定了我国婴儿配方食品中三聚氰胺限量值为1mg/kg，其他食品中三聚氰胺的限量值为2.5mg/kg。 

乳制品中的抗生素和三聚氰胺添加剂的残留目前已经成为消费者所迫切关注的焦点问题，为使牛奶中抗生素和三聚氰胺添加剂残留问题得到有效监控，符合最大残留限量标准，奶牛场、乳制品厂、政府监督部门、出入境检测、大型食品流通领域等都在努力寻求准确可行的检测方法，许多大型化学试剂和仪器公司也致力于开发β-内酰 胺类和三聚氰胺残留检测的方法和仪器。 

目前，牛奶及生鲜奶中β-内酰胺类和三聚氰胺残留的检测方法依据不同的检测原理，大体可分为三大类：微生物受阻检测、仪器检测法、免疫学分析法。微生物受阻检测方法，主要有抑菌圈试验、浑浊度试验、变色型检测金标试剂盒方法，微生物检测方法检测成本价低，但是灵敏度低、耗时长、耐药菌的存在容易导致误检；仪器检测方法，是目前检测β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺的主要方法，有高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气相色谱法、气相色谱-串联质谱法等，仪器检测方法精确度高，但其存在检测成本高，检测设备复杂，对检测人员的要求较高，检测耗时长等缺点，目前常用的免疫学分析法，主要为酶联免疫检测法和放射免疫分析法，两种方法的前处理过程较为复杂，对于现场大规模筛查样品还存在着一定局限性。 

中国发明专利200810162588.5(CN101429241A)中公开了“青霉素与载体蛋白偶联产物和β-内酰胺类青霉素抗体制备的方法及用途”，该方法中的青霉素单克隆抗体制备的酶联免疫试剂盒仅能检测青霉素G、氨苄青霉素、羧苄青霉素三种β-内酰胺类抗生素，检测药物种类少，制备的胶体金试纸条检测灵敏度低。目前免疫分析领域缺乏能够同时检测β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺的技术及其应用。因此，在实践中有必要建立一种检测药物种类多、敏感度高、操作简单、成本低、适合大规模推广的检测方法。 

发明内容

本发明的一个目的是提供一种能够同时检测β-内酰胺类抗生素和三聚氰胺的试剂盒。