[发明专利]多组分骨组织工程支架材料及其制备方法

说明书

技术领域

 本发明涉及一种多组分骨组织工程支架材料及其制备方法，属于骨修复生物材料技术。

背景技术

目前，各类骨科疾病越来越严重，骨修复与再生是一普遍而复杂的临床问题。许多人由于缺乏理想的替代材料而死亡。目前的植骨材料主要有自体骨、同种异体骨、经特殊处理的异种骨，但是这些策略均存在一定的局限性，使用受到限制。支架基骨组织工程策略是解决骨缺损的有效途径。理想的骨组织工程材料应该具有合适的生物降解性，力学性能和生物相容性。应该为细胞和组织的生长提供适宜的微环境，它不仅要为细胞的生长提供支撑作用，更重要的是要为细胞的生长提供诱导特性，促进新的骨组织的再生。

羟基磷灰石/高聚物复合材料可以很好地模拟天然骨的结构和组成，是一种理想的骨组织工程支架材料。HA/高聚物可以通过直接混合 羟基磷灰石（HA）晶体与高聚物获得，但是这种方法制备的复合物中，HA颗粒分散不均匀，容易发生团聚现象。而且在材料降解过程中 HA颗粒可能从支架材料中脱离出来，从而损伤周围的组织。通过生物矿化制备的复合材料，其高聚物表面形成 HA涂层，这种制备方法可以很好地通过高聚物的特性来调控 HA晶体的大小以及形貌，同时这种材料具有很好的生物相容性，但是由于细胞与材料直接接触的是 HA涂层， 所以其中的高聚物组分在使用过程中所起的作用是微乎其微的。 这与在短期内最大限度地模拟天然骨的组成和结构的要求还有一定的差别。

发明内容

本发明的目的在于提供一种多组分骨组织工程支架材料及其制备方法，以该方法制得的骨组织工程支架材料具有与天然骨相似的结构及优良的力学性能，克服了传统支架中 HA颗粒分散不均一，容易团聚的缺点，同时可发挥各组分的作用，在骨组织工程中具有很好的应用前景。

本发明是通过以下技术方案加以实现的，一种多组分骨组织工程支架材料，其特征在于，该多组分骨组织工程支架材料由下列组分及其质量含量百分比组成，且各组分质量百分比含量之和为100％：

壳聚糖：3.6%～63%，

明胶：3%～56.7%，

果胶：0.6%～56.7%，

纳米羟基磷灰石：10%～72%。

上述的多组分骨组织工程支架材料的制备方法，其特征在于包括以下过程：

(1)     将果胶溶于去离子水中，制备成浓度为每毫升含1～4毫克的果胶溶液；将壳聚糖溶解于1%～3%的乙酸溶液中，制备成浓度为每毫升含2～4毫克壳聚糖的乙酸溶液；

(2)     将硝酸钙溶于步骤(1)所制备的果胶溶液中，配制成含钙离子浓度为0.05～0.5mol/L的混合溶液，记为A溶液；将磷酸二氢钠溶于步骤(1)所制备的壳聚糖乙酸溶液中，配制成含磷酸根离子浓度为0.30～0.3mol/L的混合溶液，记为B溶液；

(3)     按钙离子与磷酸根物质量之比为1.67：1，将步骤(2)制备的B溶液滴加到A溶液中；并用NaOH溶液调节pH值为3.0-13.0；搅拌6～20小时，得到混合液；

(4)     将步骤（3）得到的混合液，静置6到48小时，经离心分离，收集固体分并用去离子水洗涤至洗涤液pH 为 7，最后冷冻干燥获得粒径为10-100 nm的纳米羟基磷灰石/壳聚糖-果胶复合物(nHCP)；

(5)     将每毫升含有2~4毫克的明胶水溶液与每毫升含2～4毫克壳聚糖的乙酸溶液，按两种溶液中的壳聚糖与明胶的质量比为(3～7):(7～3)的比例进行搅拌10～12小时混合；形成壳聚糖-明胶（CG）溶液；

(6)     按纳米羟基磷灰石/壳聚糖-果胶复合物(nHCP)的质量含量为10%～90%，将步骤(4)所制备的纳米羟基磷灰石/壳聚糖-果胶复合物(nHCP)，加入步骤（5）所制备的壳聚糖-明胶溶液中，超声分散 5~20 min，使其形成均一的分散液；

(7)     将步骤（6）获得的分散液与质量含量为0.25%的戊二醛溶液按体积比为(10～2)：1，搅拌下将其混合得到铸模液，将铸模液加入模具中，在温度为-20℃～-60℃下预冻8小时以上，得到的凝胶在真空冷冻干燥机中冷冻干燥，得到支架材料；

(8)     将步骤（7）得到的支架材料在质量浓度为1%～5%的氢氧化钠溶液中浸泡3～8小时，除去残留的乙酸，再将其置于质量浓度为2%～5%的硼氢化钠溶液中浸泡3～8小时，除去游离的戊二醛，用去离子水反复冲洗、浸泡至溶液呈中性，然后再次在温度为-20℃～-60℃下预冻8小时以上，再次于真空冷冻干燥机中冷冻干燥，最终得到多组分骨组织工程支架材料（nHCP/CG）。