[发明专利]一种用免疫透射比浊法测定载脂蛋白A2的方法及试剂盒

权利要求书

1.一种用免疫透射比浊法测定载脂蛋白A2的方法，其特征在于，该方法包括：

向待测样品中加入反应剂，解除样本中抗原周围的电子层和水化层，使抗原位点充分暴露；

向待测样品中加入抗ApoA II抗体溶液，形成不溶性的抗原-抗体复合物；

测定所述不溶性抗原-抗体复合物的吸光度值，与已知ApoA II抗原浓度的校准液的吸光度值比较；

通过以下公式计算出样本中ApoA II的含量：

式中：ΔAu为以空白管吸光度为对照的待测样品的吸光度值

ΔAs为以空白管吸光度为对照的校准品的吸光度值

Cs为校准品中ApoA II的浓度；

其中，所述反应剂包括：防腐剂0.2-1.5g/L、稳定剂0.5-3g/L、电解质0.1-6g/L、表面活性剂1-10g/L，高分子加速剂2-5g/L和反应促进剂0.1-0.5g/L，其余是10-200mmol/L的缓冲液；

所述抗ApoA II抗体溶液包括：抗ApoA II抗体5-60g/L、抗氧化剂0.01-0.8g/L、稳定剂1-30g/L，防腐剂0.01-5g/L、电解质0.1-6g/L、高分子加速剂2-5g/L和表面活性剂0.1-10g/L，其余是10-200mmol/L的缓冲液；

其中，所述稳定剂选自以下物质中的一种和几种：

乙二醇(α-氨基乙基)醚四乙酸、亚氨基二乙酸、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、1，2-环己二醇缩水甘油、二乙烯三胺五乙酸钠和六聚甘油二油酸酯；

所述的高分子加速剂选自以下物质中的一种和几种：

脂肪醇聚氧乙烯醚、聚乙烯吡咯烷酮、乙二醇聚氧乙烯醚、羟丙基甲基纤维素、羟甲基纤维素钠和聚丙烯酸钠。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述稳定剂选自以下物质中的一种和几种：亚氨基二乙酸、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、1，2-环己二醇缩水甘油和二乙烯三胺五乙酸钠；

所述的高分子加速剂为聚乙烯吡咯烷酮和/或乙二醇聚氧乙烯醚。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述稳定剂为二乙烯三胺五乙酸钠；

所述的高分子加速剂为聚乙烯吡咯烷酮。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述反应剂和抗ApoA II抗体溶液的体积比为3∶1至7∶1。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述反应剂和抗ApoA II抗体溶液的体积比为3∶1、4∶1、5∶1、6∶1或7∶1。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述的反应剂和所述抗ApoA II抗体溶液中的缓冲液PH值为5-10，所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、哌嗪-1，4-二乙磺酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、N-2-羟乙基哌嗪-N′-2-乙磺酸缓冲液、N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙烷磺酸缓冲液、3-环己胺基-2-羟基丙磺酸缓冲液、甘氨酸缓冲液和硼砂-氢氧化钠缓冲液中的至少一种；

所述的表面活性剂选自非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂和两性离子表面活性剂中的一种或多种；

所述的电解质是阴离子电解质和/或阳离子电解质；

所述的防腐剂选自proclin 300、5溴-5硝基-1，3二烷、异噻唑啉酮、氯乙酰胺、2-羟基吡啶-N-氧化物和咪唑烷基脲中的一种或多种；

所述抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯和特丁基对苯二酚、维生素A、维生素C、维生素E和类胡萝卜素中的一种或几种，

反应促进剂是溴化乙二甲胺和/或聚凝胺。