[发明专利]双功能单体利血平的分子印迹聚合物和其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于饲料添加剂检测领域，特别属于利用分子印迹技术检测饲料中的利血平。

背景技术

利血平(Reserpine)属吲哚类生物碱。在饲料中利血平主要作为镇静类药物添加剂，残留在动物性食品中的利血平，人食用后会产生不良后果，易引起嗜睡、食欲减退等反应，小孩食用后会影响大脑发育，并有致畸作用。因此，农业部、卫生部和国家药品监督管理局第176号公告，禁止在饲料和动物饮用水中使用利血平作为饲料添加剂。因此需要对饲料中利血平进行检测。

分子印迹技术是一种制备具有分子识别能力聚合物的技术。制备分子印迹聚合物一般需要三个过程：(1)印迹分子(被识别物质)和功能单体相互作用，形成复合物；(2)通过交联剂，在印迹分子与功能单体复合物周围进行聚合反应，形成具有大孔、网状的聚合物；(3)选取适当的方法除去印迹分子就可以得到分子印迹聚合物。这样制备得到的分子印迹聚合物中存在着和印迹分子在空间结构完全匹配，并含有与印迹分子互补功能基团的三维孔穴。

分子印迹聚合物以其优良的性能广泛应用于生物、医学、化学等领域。用茶碱印迹的聚合物测定病人血清中的茶碱含量，所得结果同酶联免疫分析(EMIT)的测定结果一致。分子印迹传感器甚至可检测1～50μmol的印迹分子，可见具有高度的选择性和灵敏性。理论上分子印迹技术可对任何物质进行印迹，因此采用分子印迹技术检测饲料中的利血平具有很大的潜质。

发明内容

本发明的目的在于制备一种用于检测利血平的分子印迹聚合物，能够达到良好的利血平检测效果。

本发明提供的利血平分子印迹聚合物的制备方法，包括以下步骤：

将功能单体和模板分子利血平溶解于二甲亚砜中，室温混合6-24小时，然后加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯和引发剂，超声脱气，通氮气除氧，密封后热引发聚合，清洗除去模板分子，其中所述功能单体含有烯丙基-β-环糊精。

其中所述功能单体含有烯丙基-β-环糊精和甲基丙烯酸。

其中烯丙基-β-环糊精与模板分子的比例为：1g∶0.1-2.0mmol，优选1g∶0.2-1.0mmol，更优选1g∶0.6-1.0mmol，最优选1g∶0.8mmol。

其中模板分子与交联剂的摩尔比为：1∶5-35，优选1∶10-35，更优选1∶10-25，最优选1∶15。

其中模板分子与甲基丙烯酸的摩尔比为：1∶1-10，优选为1∶2-8，最优选1∶2。

其中烯丙基-β-环糊精、甲基丙烯酸、模板分子、交联剂的比例为：1g∶1.6mmol∶0.8mmol∶15mmol。

其中超声脱气时间至少5分钟。

其中氧气除氧时间至少5分钟。

采用甲醇和乙酸的混合溶液清洗除去模板分子。

其中甲醇和乙酸的体积比为1∶9。

本发明提供一种利血平分子印迹聚合物，其采用上述方法制备得到。

本发明达到的效果：

利用β-环糊精本身的分子识别能力与分子印迹技术的分子识别能力，制备了利血平分子印迹聚合物，通过优化各种原料比例得到了较好的识别效果。由于β-环糊精的修饰对其分子识别效果影响很大，因此选择对其结构变化相对较小的烯丙基引入可聚合单元，充分利用了β-环糊精和分子印迹技术的双重识别能力，提高了识别效果。采用双功能单体，采用多种识别方式，进一步提高了识别能力。

具体实施方式

实施例1

准确称取功能单体烯丙基-β-环糊精(采用文献“化学试剂，2002，24(3)，131～132；138”的方法合成)1g和模板分子利血平0.2mmol溶解于50ml二甲亚砜(DMSO)中，室温下混合12h，使功能单体与模板分子充分作用，然后加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)5mmol和20mg引发剂偶氮二异丁腈(AIBN)，超声脱气10分钟，通入氮气10分钟，真空下密封，60℃空气浴中聚合48h得到分子印迹聚合物。

将分子印迹聚合物粉碎后研磨筛分，取400目和500目之间的颗粒(粒度30.8～38.5μm)，用丙酮多次悬浮沉降除去细粉。将1.5g聚合物分散于乙醇匀浆液中，在28MPa的压力下，用乙醇作顶替液，采用湿法装入尺寸为：250mm×Φ4mm的色谱柱中。

将填充好的色谱柱用甲醇∶乙酸＝1∶9(V∶V)的溶液洗脱，用HPLC进行分析，UV检测器波长268nm，至基线走平，认为印迹分子进本洗脱完全。