[发明专利]一株从白蚁肠道内分离的固氮菌

说明书

技术领域

本发明涉及一株固氮菌。

背景技术

白蚁Termite属于节肢动物门昆虫纲有翅亚纲等翅目的昆虫，是较为古老的社会性害 虫，主要以富含纤维素、半纤维素和木质素等木质材料为食，这种本领是靠其后肠内的 微生物的作用。Termite若丧失了肠道中消化木质素和纤维素的微生物的作用，就会因为 不能消化木材而死。

Termite属于典型的寡氮营养型生物，其肠道固氮微生物的固氮作用是白蚁体内氮素 的主要来源。Termite肠道固氮菌及其代谢产物可能直接作为Termite生长的氮源，这 使Termite得以利用含氮极低的木质食物为生。固氮作用是Termite生命活动必不可 少的，可以通过破坏Termite的固氮系统，使Termite氮素营养不良而死亡，这不失 为是一种值得探索的防治白蚁方法与途径。目前，对于Termite氮营养方面，还有许 多重要问题仍需作进一步研究，这不仅具有理论意义，而且也有一定的应用意义。

发明内容

本发明提供了一株从白蚁肠道内分离的固氮菌。

一株从白蚁肠道内分离的固氮菌，它为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae) HUB-IV-004，属于克雷伯菌属(Klebsiella)，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏地 址为武汉市武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2011312，保藏日期为2011年9月15 日；它为革兰氏阴性菌，呈短杆状，长为2.0μm～2.2μm，宽为1.6μm～2μm，有荚膜； 在无氮培养基上形成乳白色半透明的圆形菌落，菌落边缘整齐，表面湿润不易挑取，培养 5d后有褐色色素产生。

本发明中一株从白蚁肠道内分离的固氮菌，它为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella  pneumoniae)HUB-IV-004，其半固体穿刺试验阴性、淀粉水解试验阳性、脂肪水解试验阴 性、明胶水解试验阴性、H₂S试验阳性、尿素试验阳性、吲哚试验阴性、甲基红试验阳性、 伏普试验阳性、柠檬酸盐试验阳性、尿酶试验阳性、蔗糖试验产酸产气、麦芽糖试验产酸 产气、D-山梨醇试验产酸产气、鼠李糖试验产酸产气、甘露醇试验产酸产气、乳糖试验产 酸产气、海藻糖试验产酸产气，最适生长温度为37℃，最适合生长pH为7.0±0.2。

本发明一株从白蚁肠道内分离的固氮菌，它为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae) HUB-IV-004，经16S rDNA测序其基因序列与GenBank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)数 据库中已知细菌16S rDNA基因序列进行比对，获取相近典型菌株的基因序列；利用 MEGA4.1和Clustal X软件绘制固氮菌株HUB-IV-004的系统进化树，菌株HUB-IV-004与 K.pneumoniae 342菌株的亲缘关系最近，比对后相似性达99％；结合菌株HUB-IV-004形 态学观察、生理生化试验鉴定结果，确定菌株HUB-IV-004为克雷伯菌属(Klebsiella)的 一个新菌株，命名为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)HUB-IV-004。

本发明一株从白蚁肠道内分离的固氮菌，它为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae) HUB-IV-004，属于克雷伯菌属(Klebsiella)，已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏地 址为武汉市武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2011312，保藏日期为2011年9月15 日。

本发明从白蚁肠道内分离固氮菌株，并采用分子生物学方法对其进行鉴定，并结合生 理生化特性等对其进行分类学鉴定，确定其种类地位，本发明肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella  pneumoniae)HUB-IV-004，属于克雷伯菌属(Klebsiella)，它作为指示菌，可以被树木内 生菌发酵产物所抑制，从而破坏白蚁的固氮系统，白蚁氮氮素营养不良而死亡，达到防 治白蚁的目的，同时开发了可利用的固氮微生物资源及筛选，对开发人畜无毒、环保的 杀白蚁生物药剂具有重要的理论意义和现实意义。

附图说明

图1为具体实施方式一中16S rDNA PCR扩增产物电泳图，其中M：DNA Marker  DL2000，Lane 1：HUB-IV-004 16S rDNA扩增片段；