[发明专利]用于海绵共生土曲霉发酵制备Terrein的培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种真菌培养技术领域的培养基及其制备方法，具体是一种海绵共生土曲霉发酵制备Terrein的培养基及其制备方法。 

背景技术

Terrein（土曲霉酮）是一种环戊烯酮类化合物，最初由土曲霉发酵得到，尽管发现距今已有70余年，但它的许多活性却是直到本世纪才被陆续发现的。Terrein的活性十分多样，不仅具有抗细菌、真菌、杂草的活性，还可以抑制肿瘤细胞血管新生素的分泌，抑制黑色素合成，抑制皮肤角质增生，抑制牙髓细胞炎症反应，促进成骨细胞与钛支架融合等。可以预见Terrein将来在医疗、美容、农业等众多领域会有良好的应用前景，当然前提是Terrein的制备技术取得突破。 

然而现有的Terrein制备方法都存在一些不足。首先，一些化学合成制备Terrein的技术往往有总产率低，需要采用高温高压等极端反应条件，需要昂贵的反应试剂，或是终产物不具备立体结构的选择性等缺点（Lee S, et al. Synthesis and melanin biosynthesis inhibitory activity of (±)-terrein produced by Penicillium sp. 20135. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 2005;15:471-473）。其次，采用微生物发酵制备Terrein的技术产量又十分有限，少则数百μg/L（Phattanawasin P, et al. Weed growth inhibitors from Aspergillus fischeri TISTR 3272. Natural Product Research 2007;21:1286-1291），多则数百mg/L（M. Demasi, et al. Studies on Terrein as a New Class of Proteasome Inhibitors. Journal of the Brazilian Chemical Society 2010;21:229-305），而未能达到具备生产价值的g/L量级。 

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的上述缺点，提供一种海绵共生土曲霉发酵制备Terrein的培养基及其制备方法。采用本发明的方法对海绵共生土曲霉产Terrein的培养基成分进行了优化，使得Terrein的产量有明显提高。 

本发明的目的是通过以下技术方案实现的： 

本发明涉及一种用于海绵共生土曲霉发酵制备Terrein的培养基，所述培养基包括：葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、麦芽提取物、谷氨酸钠、氯化铵以及人工海水。

优选的，所述海绵共生土曲霉为土曲霉（Aspergillus terreus）PF26 CGMCC NO.5208。 

优选的，所述培养基具体为：当培养基中含有的人工海水为1L时，培养基含有葡萄糖28.41g、麦芽糖23.18g、甘露醇20.00g、麦芽提取物8.52g、谷氨酸钠10.00g、氯化铵10.00g。 

优选的，所述人工海水具体为，人工海水由以下质量的各组份：氯化钠 26.518g、氯化镁 2.447g、硫酸镁 3.305g、氯化钙  1.141g、氯化钾 0.725g、碳酸氢钠  0.202g、溴化钠 0.083g，溶解于1L蒸馏水中组成；所述人工海水的pH值为7.0～7.2。 

本发明还涉及一种上述的用于海绵共生土曲霉发酵制备Terrein的培养基的制备方法，包括以下步骤： 

第一步，配制人工海水；

第二步，在配制好的人工海水中加入葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、麦芽提取物、谷氨酸钠和氯化铵并搅拌溶解，然后进行高温杀菌得到培养基。

优选的，第二步中，所述培养基具体为，当培养基含有的人工海水为1L时，培养基含有葡萄糖28.41g、麦芽糖23.18g、甘露醇20.00g、麦芽提取物8.52g、谷氨酸钠10.00g、氯化铵10.00g。 

优选的，第一步中，所述配制人工海水具体为，配置人工海水包括如下步骤：将26.518g氯化钠、2.447g氯化镁、3.305g硫酸镁、1.141g氯化钙  、0.725g氯化钾、0.202g 碳酸氢钠以及0.083g溴化钠溶解于1L蒸馏水中，即得， 所述配制好的人工海水的pH值为7.0～7.2。