[发明专利]全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法

权利要求书

1.全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于包括以下步骤：

1)称定1-脱氧野尻霉素对照品各两份，作为对照品液1和对照品液2；

2)吸取对照品液1和对照品液2，进样；

3)称取待测全蚕粉，加入石油醚，在水浴中加热回流提取，过滤，弃去滤液，挥干石油醚，得产物A；

4)在产物A中加入甲醇，超声提取，过滤，将滤液浓缩，再置于中性氧化铝柱，洗脱，收集洗脱溶液，蒸干，再用甲醇溶解并定容，作为供试品溶液；

5)对步骤4)所得的供试品溶液进行HPLC分析，根据峰面积值，用外标两点法计算步骤3)所用待测全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量。

2.如权利要求1所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于在步骤1)中，所述对照品液1的浓度为0.82mg/mL，对照品液2的浓度为0.74mg/mL。

3.如权利要求1所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于在步骤2)中，所述吸取对照品液1为10μl，所述对照品液2为10μl。

4.如权利要求1所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于在步骤3)中，所述待测全蚕粉每份为0.5～2g，加入石油醚的量为15～60mL。

5.如权利要求1所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于在步骤3)中，所述在水浴中加热回流提取的时间为0.5～2h。

6.如权利要求1所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于在步骤4)中，在产物A中加入甲醇的量为15～60mL。

7.如权利要求1所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于在步骤4)中，所述超声提取的时间为0.5～2h；所述将滤液浓缩，是浓缩至1～10mL；所述洗脱采用0.02mol/L HCl洗脱并调节流速至20～60滴/min。

8.如权利要求1所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于在步骤5)中，所述HPLC分析是采用包含有紫外检测器的高效液相色谱仪进行检测，检测波长为190～400nm，所用高效液相色谱的固定相为反相色谱柱，柱温为20～50℃；所述流动相为水与乙腈的混合液，其中有机相的比例为20％～90％，以流动相质量为100％计，水在流动相中所占的质量百分比为10％～80％。

9.如权利要求8所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于所述水在流动相中所占的质量百分比为20％～70％。

10.如权利要求9所述的全蚕粉中1-脱氧野尻霉素含量的测定方法，其特征在于所述水在流动相中所占的质量百分比为30％～60％。