[发明专利]一种半定量检测人血清中GFAP浓度的胶体金试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶体金试纸条，尤其涉及一种半定量检测人血清中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)浓度的胶体金试纸条。 

背景技术

流行病学调查研究表明，目前脑血管疾病与心脏病、恶性肿瘤构成人类疾病死亡的三大原因。与西方发达国家相比，我国脑血管病的发病率和死亡率明显高于心血管病。据估算，全国每年新发脑卒中患者约为200万人；每年死于脑卒中的患者约150万人；存活患者人数600万～700万；且70％～80％的存活者遗留瘫痪、失语等严重残疾，给社会和家庭带来沉重负担。其中脑出血是一种致死率和致残率均高的常见病、多发病，严重危害人类特别是老年人的健康，威胁病人的生命，严重影响病人生活质量。 

胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)是一种分子量为50～52KDa的酸性蛋白，属细胞骨骼蛋白，是星形细胞胞质内的特异性蛋白，标志蛋白。GFAP在星形胶质细胞受到刺激引起反应时，其表达发生变化，在星形细胞中有丰富的、唯一的表达。研究发现GFAP和痴呆、多发性硬化及脑卒中有明显相关性。脑出血后神经元和神经胶质细胞受到损害，大量的胞浆蛋白质漏出细胞进入细胞间液，可溶性的GFAP通过细胞间液进入脑脊液，穿过破坏的血脑屏障进入血液循环。有研究表明脑出血患者发病6小时内血清GFAP水平即明显升高，而缺血性脑卒中患者6小时内血清GFAP水平与正常对照组无明显差异，因此认为GFAP是急性脑出血的生物学标志物。此外，还有研究表明，急性脑出血患者血清中的GFAP与脑出血体积之间有着密切的正相关关系，因此可以通过脑出血患者血清GFAP水平来判断患者的病情和预后。 

目前，临床诊断上对GFAP的检测主要是ELISA实验方法，该方法因其特异性、灵敏度高而在近二十年来被广泛应用，但同时该方法检测方法繁琐，所需检验时间较长(1～2小时)，而且往往需要积攒到一定数量样品之后，才能进行检测，检测被延误，而胶体金法则具有很多优势，能够弥补其不足：a)快速：全部检测过程仅需5-10分钟，大大缩短了检测时间。b)简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，可随时随地进行。c)检测结果直观。检测结果直接用颜色显示，肉眼判断容易，不需要特别仪器设备，只需要试纸条，样品只要做非常简单的处理或不需要做前处理。d)可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，患者可立刻拿到结果，不必等待。e)稳定性好：金标试剂稳定，不受温度等外界环境的影响，可长期保存。然而，检索结果表明，利用胶体金法检测检测人血清中GFAP浓度的文献还未见报道。 

发明内容

针对现有技术的不足，本发明要解决的问题是提供一种快速半定量检测人血清中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)浓度的胶体金试纸条。 

本发明所述半定量检测人血清中GFAP浓度的胶体金试纸条，是在PVC板上粘附检测膜片、胶体金结合膜片和吸水纸层制成，其特征在于：所述胶体金结合膜片上包被有胶体金标记的抗-GFAP抗体，所述检测膜片上设有检测线和质控线，其中检测线上固定有抗-GFAP捕获抗体，质控线上固定有兔抗鼠IgG；所述试纸条自下而上依次为加样处、胶体金结合膜片、检测线、质控线、吸水纸。 

上述的半定量检测人血清中GFAP浓度的胶体金试纸条中，所述胶体金标记的抗-GFAP抗体及检测线上包被的抗-GFAP捕获抗体为能够识别不同表位的单克隆抗体。 

上述的半定量检测人血清中GFAP浓度的胶体金试纸条中，所述胶体金结合膜片由玻璃纤维素纸制得，所述检测膜片由硝酸纤维素膜制得。 

上述的半定量检测人血清中GFAP浓度的胶体金试纸条中，所述检测线可以设为多条且间隔设置，优选的实施方式是4条且间隔设置，检测线上固定的抗-GFAP捕获抗体的包被量代表了能够检出的GFAP浓度，自上而下依次为16ng/ml、8ng/ml、4ng/ml、2ng/ml。 

本发明所述半定量检测人血清中GFAP浓度的胶体金试纸条在制备检测试剂盒中的应用，其中所述半定量检测人血清中GFAP浓度的试剂盒包括以下组分： 

1)10条单人份检测卡；检测卡由试纸条外壳与试纸条构成，试纸条由胶体金膜片(喷有由抗-GFAP单克隆抗体标记的胶体金)、检测膜片(检测线包被有抗-GFAP捕获单克隆抗体，质控线包被有兔抗鼠IgG抗体)、吸水纸、衬膜片构成；2)说明书一份；3)标准比色卡一张。