[发明专利]一种白龙须总皂苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从植物体内提取制备皂苷的方法，具体涉及一种白龙须总皂苷的制备方法。

背景技术

白龙须为百合科长蕊万寿竹Disporum bodinieri(Lev.l EtVaut.)Wang et Tang和万寿竹D.cantoniens(Lour.)Merr的根及根茎，为恩施民族药物，味甘，平，具滋阴清热、化痰止咳、舒筋活血之功效，主治咳嗽、咯血、热病后期虚热、消化道出血、白带异常、烧烫伤、骨折等症。文献“白龙须抗炎作用的实验研究”表明白龙须总皂苷高、低剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01)，对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性与生理盐水组比较也具有显著性差异(P<0.05，P<0.01)。白龙须皂苷具有显著抗炎作用。

目前，尚未见白龙须总皂苷的提取研究报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明所要解决的问题是提供一种白龙须总皂苷的制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种白龙须总皂苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）酶解：将白龙须药材粉碎，加入适量蒸馏水和0.3-0.8%生物酶自然酶解30~90min，得酶解原料；

（2）回流提取：将上述酶解原料置于提取设备中，加入3-7倍蒸馏水，加热回流提取1-2次，收集提取液；

（3）分离：上述提取液通过大孔吸附树脂柱吸附，以3~8BV蒸馏水洗脱杂质，再用5-60%乙醇溶液洗脱，收集30-60%醇溶液洗脱液；

（4）纯化：将上述醇洗液浓缩成浸膏，无水乙醇回流溶解，滤液回收乙醇至小体积，放置沉淀，滤出沉淀干燥即得白龙须总皂苷。

所述步骤（3）中药材量与树脂的比例1:1~1.5，上柱流速1~4BV/h，树脂柱径高比为1:3~9。

所述步骤（3）中大孔树脂型号可选HPD-400、X-5和D101中的一种。

本发明的提取工艺采用酶法和大孔树脂纯化相结合，可以破坏植物纤维，切断皂苷和大分子的键合，提取率高，提取时间短，提取效率高，能耗低；提取液经大孔吸附树脂法进行纯化处理，除去大量糖类杂质，并通过收集不同浓度乙醇的洗脱物，得到纯度较高的白龙须总皂苷，整个工艺操作简单，易于放大。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

将白龙须药材粉碎，取2kg，加入适量蒸馏水和16g生物酶自然酶解30min，得酶解原料，将酶解原料置于提取设备中，加入3倍蒸馏水，回流提取2次，离心得到提取液，取2kgD101大孔树脂装柱（径高比1:9），提取液上柱吸附，吸附流速为1BV/h，以6L蒸馏水洗脱杂质，再用5%、15%、30%、60%乙醇溶液洗脱，收集30%、60%乙醇溶液洗脱液，浓缩成浸膏，无水乙醇回流溶解，滤液回收乙醇至小体积，放置沉淀，滤出沉淀干燥即得白龙须总皂苷22.1g，含量为83.3%。

实施例2：

将白龙须药材粉碎，取2kg，加入适量蒸馏水和6g生物酶自然酶解90min，得酶解原料，将酶解原料置于提取设备中，加入7倍蒸馏水，回流提取1次，离心得到提取液，取3kgHPD-400大孔树脂装柱（径高比1:3），提取液上柱吸附，吸附流速为4BV/h，以16L蒸馏水洗脱杂质，再用5%、15%、30%、60%乙醇溶液洗脱，收集30%、60%乙醇溶液洗脱液，浓缩成浸膏，无水乙醇回流溶解，滤液回收乙醇至小体积，放置沉淀，滤出沉淀干燥即得白龙须总皂苷18.9g，含量为89.7%。

实施例3：

将白龙须药材粉碎，取2kg，加入适量蒸馏水和15g生物酶自然酶解60min，得酶解原料，将酶解原料置于提取设备中，加入5倍蒸馏水，回流提取2次，离心得到提取液，取2.5kgX-5大孔树脂装柱（径高比1:9），提取液上柱吸附，吸附流速为2BV/h，以8L蒸馏水洗脱杂质，再用5%、25%、40%、60%乙醇溶液洗脱，收集40%、60%乙醇溶液洗脱液，浓缩成浸膏，无水乙醇回流溶解，滤液回收乙醇至小体积，放置沉淀，滤出沉淀干燥即得白龙须总皂苷25.3g，含量为81.1%。

实施例4：