[发明专利]心舒胶囊中人参皂苷Rg1和Rb1含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于传统中药制剂的技术领域，更具体地说本发明涉及一种新舒胶囊有效成分定量测定的技术领域。 

背景技术

心舒胶囊是吉林天药本草堂制药有限公司在传统产品新舒丸的基础上经过改革而研制成的新制药，它是由三七、丹参、冰片、藤合欢、木香、苏合香等中药制成。具有形气活血、通窍、解郁的功效，用于冠心病引起的胸闷气短、心绞痛。人参皂苷Rg₁、Rb₁是方中人参的主要有效成分，为控制该药品的质量，保证疗效，需对对方中的人参皂苷Rg₁、Rb₁进行测定，以确保其含量在规定的范围之内。 

现有技术中通常使用高效液相色谱法(HPLC)测定心舒胶囊中人参皂苷Rg₁、Rb₁的含量。中药材中化合物组成份复杂，次生代谢产物结构非常类似，并有较多的异构体存在，且活性成分含量往往较低，所以常规检测方法难以适用。HPLC和其他分离方法相比具有柱效高、灵敏度高、适用范围广等优点，为中药分析研究工作提供了条件。近年来，应用高效液相色谱分析中药成分已成为控制中药质量的重要手段之一。 

等度和梯度洗脱是高效液相色谱中的两种基本操作模式。前者在分离的过程中流动相的组成不随时间的改变而发生变化，而后者则会发生变化，其中又以线性和阶梯梯度应用最多。在实践中，通过将等度、线性和阶梯梯度进行组合，可衍生出无数种具有不同形状的梯度曲线，这就大大增加了分离条件选择的灵活性。此外，梯度洗脱还可以缩短分析时间以及压缩谱带的宽 度，因此在复杂样品如中药等的分离中有着非常广泛的应用。 

文献1-心舒胶囊质量标准研究，《中成药》，第27卷第9期中，作者给出的人参皂苷Rg₁和Rb₁的定量测定方法采用的是等度洗脱方法。该方法由于分离度较差，需要分别检测Rg₁和Rb₁，检测时间很长、成本较高。因而非常有必要开发一种高效液相色谱梯度洗脱方法，能够一次进样同时测定人参皂苷Rg₁和Rb₁的含量。然而尽管现有技术中已开发出了一些中药材3种皂苷含量的高效液相色谱梯度洗脱同时测定方法，例如：文献2-高效液相色谱梯度洗脱法同时测定保心宁片中3种皂苷含量，《药物鉴定》，第20卷第1期；文献3-HPLC测定益心舒胶囊中人参皂苷Rg₁，Re，Rb₁，《中国实验方剂学杂志》，第16卷第11期。但遗憾的是由于心舒胶囊原料药组分分离，次生代谢产物高度类似，难以厘清其洗脱机理；而等度、梯度洗脱的组合衍生数近似于天文数字，并且梯度洗脱的分离机理极为复杂，因而不能通过常规的设计实验来筛选得到。 

发明内容

本发明为解决现有技术中心舒胶囊中有效成分人参皂苷Rg₁和Rb₁的定量测定方法分离度差，需要分别检测以及检测花费时间长和成本高的技术问题，提供一种心舒胶囊中人参皂苷Rg₁和Rb₁含量的测定方法，该方法经过发明人长达数年坚持不懈的努力和创造性的实验设计得出。 

为了解决上述技术问题，本发明采用了以下技术方案： 

一种心舒胶囊中人参皂苷Rg₁和Rb₁含量的测定方法，其包括以下步骤： 

(1)色谱条件与系统适用性试验色谱柱：Agilent TC-C18，4.6×250mm；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按照下表进行等度和线性梯度洗脱； 流速为每分钟1ml；柱温为30℃；检测波长为203nm；理论塔板数按人参皂苷Rb₁峰计算不低于5000； 

(2)对照品溶液的制备取人参皂苷Rb₁和Rg₁对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1ml含Rb₁和Rg₁各0.2mg的溶液，即得； 

(3)供试品溶液的制备取本品2g，精密称定，置索氏提取器中加乙醚约90ml回流脱脂1小时，残渣挥尽乙醚，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，超声处理的功率为250W，频率为20KHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得；