[发明专利]用于检测水产动物病毒的检测试剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测水产动物病毒的检测试剂套组。

背景技术

在亚洲及欧洲国家中，石斑鱼是鱼类中重要的品种，其可产生高经济价值。然而，因幼体会遭受病毒的伤害，使幼体的繁殖比例相当低。有多种病毒会攻击石斑鱼，如神经坏死病毒NNV(nervous necrosis virus)、虹彩病毒(irido virus)和感染性胰脏坏死病毒(infection pancreatic necrosis virus)。而神经坏死病毒对于石斑鱼幼体会造成伤害，并且导致死亡率高于90％以上。

神经坏死病毒NNV是一种核酸病毒，属于野田病毒中的β-野田病毒(beranodavirus)的一种。神经坏死病毒的大小约为25-30纳米，其包含两种核糖核酸(RNA)：RNA1及RNA2，其中RNA1可表现蛋白质A，而RNA2可表现蛋白质α，形成NNV的帽结构。常见用于定量检测NNV的步骤是包含从石斑鱼组织中萃取出NNV的微颗粒，并进行RNA反转录为DNA，最后利用实时定量聚合酶连锁反应，亦是实时聚合酶连锁反应。虽然上述的方法在检测NNV可表现出高灵敏度及专一性，但因在操作流程中需小心处理，所以仅可适用于在实验室中的熟练该技术的人员操作，此缺点严重地阻碍了检测NNV方法的普及性，并且在水产养殖业中，NNV的大范围检验很难由实时聚合酶连锁反应完成。

近年来，有许多研究团队使用酶联免疫吸附分析(ELISA)，如三明治免疫分析技术，而上述技术常因检测时的操作复杂度，无法将该技术普遍地推广。因此，具有容易操作的优点、高信赖性、高灵敏度和专一性的替代技术是近年来逐渐发展的重点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测水产动物病毒的检测试剂套组。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种用于检测水产动物病毒的检测试剂，包括：多个磁性纳米粒子，分布于水溶液中，其中这些多个磁性纳米粒子中的磁性纳米粒子的构造为：磁性核、界面活性剂层，所述界面活性剂层披覆于所述磁性核上，以及多个水产动物病毒抗体，所述多个水产动物病毒抗体结合于所述界面活性剂层上。

本发明所述的磁性纳米粒子，其材料选自于四氧化三铁(Fe₃O₄)、三氧化二铁(Fe₂O₃)、铁锰酸(MnFe₂O₄)、铁酸钴(CoFe₂O₄)及铁酸镍(NiFe₂O₄)所组成的群组。在较佳的实施例中，所述磁性纳米粒子的磁性核的材料为四氧化三铁(Fe₃O₄)。

本发明所述的界面活性剂是指能使目标溶液表面张力显著下降的物质，以及降低两种液体之间表面张力的物质，一般的界面活性剂为具有亲水与疏水基团的有机两性物质，可溶于有机溶液和水溶液。在本发明中，所使用的界面活性剂材料包含但不限于有机酸、蛋白质A、蛋白质G、葡聚糖(Dextran)或微脂粒。优选地，所述界面活性剂的材料为葡聚糖。

本发明中，所述的水产动物病毒包含神经坏死病毒、虹彩病毒和感染性胰脏坏死病毒。优选地，所述水产动物病毒是神经坏死病毒。此外，本发明所使用的水产动物指石斑鱼。

本发明另提供一种检测水产动物病毒的方法，包括提供本发明所述的检测水产动物病毒的试剂，并萃取水产动物内的病毒，进一步将试剂与萃取物混合，量测免疫磁减量讯号，并藉由下述逻辑函数定量该病毒的浓度。

IMR(%)=A-B1+(φNNVφo)γ+B]]>