[发明专利]一种人类骨髓、脐带血、外周血细胞处理试剂盒及细胞处理方法

权利要求书

1.一种人类骨髓、脐带血、外周血细胞处理试剂盒及细胞处理方法,其特征在于所述试剂盒中包含以下四种试剂：

A号液为稀释液：PBS液；

B号液为密度液：泛影酸钠-聚蔗糖400#或HISTOPAQUE1077或Ficoll；泛影酸钠-聚蔗糖400#由聚蔗糖和泛影葡胺配制成的密度为1.077±0.001的密度液；

C号液为洗涤液：0.9％氯化钠液；

D号液为红细胞裂解液：0.8％氯化氨溶液。

2.一种应用如权利要求1所述的人类骨髓、脐带血、外周血细胞处理试剂盒及细胞处理方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

将含有枸橼酸钠抗凝剂的骨髓或脐带血或外周血按大于等于1∶1的比例加入A液，混匀；根据稀释好的样品体积，取适当数量的15ml离心管，先各装4ml的B液，再各取10ml稀释好的样品铺到B液上，然后以500-850g离心25分钟，分出干细胞层，收集干细胞层后用C液清洗细胞1次，用5-10ml的C液重悬细胞，加入约三倍体积的D液，混匀，反应6分钟，再以350-550g离心10分钟，去除上清，收集干细胞后用C液清洗细胞1-2次，根据需要再用过滤器进行过滤，收集过滤后的干细胞后用C液清洗细胞1-2次，离心浓缩后用C液稀释到5-50毫升，待用。

3.一种应用如权利要求1和2所述的人类骨髓、脐带血、外周血细胞处理试剂盒及细胞处理方法，其特征在于使用0.8％氯化氨溶液处理干细胞中残留的红细胞。

4.一种应用如权利要求1和2所述的人类骨髓、脐带血、外周血细胞处理试剂盒及细胞处理方法，其特征在于使用70微米孔径过滤器过滤纯化后的干细胞，以去除凝聚的细胞或者沉淀杂质。