[发明专利]一种小型猪慢性肺动脉高压动物模型及其构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及慢性肺动脉高压动物模型领域，特别涉及一种小型猪慢性肺动脉高压动物模型及其构建方法。

背景技术

肺动脉高压（Pulmonary Hypertension，PH）主要临床表现为肺动脉压力的增高，是人类重大的心肺血管疾病之一。PH动物模型的建立是对该病进行基础和临床研究的平台。目前PH动物模型分为急性和慢性二种类型。急性动物模型的建立以低氧性或/和低压低氧性PH动物模型为主，以大白鼠较为常用（陈莉延等.白藜芦醇苷对慢性常压低氧性肺动脉高压模型中磷脂酶A_2、一氧化氮和内皮素水平的影响. 中国病理生理杂志2006），其次有小鼠、兔等实验动物。

慢性动物模型的建立以药物诱导为主，国内外常用的诱导药物主要是野百合碱（Monocrotaline, MCT）或野百合碱活性代谢物。野百合碱属双稠吡咯啶生物碱，对癌细胞DNA可发生烃化作用，而起抗癌作用，注射后主要分布于肝、肾和胃，对多种实验性肿瘤有抑制作用，临床主要试用于皮肤磷状细胞癌和基底细胞癌，疗效较好，对急性白血病、子宫颈癌和阴茎癌也有效。野百合碱是复制慢性PH疾病模型的常用药物，无论大鼠、小鼠、兔子或犬，都可以复制成功，但是其病理特征不完全相同。

MCT单次剂量（60 mg/kg）注射大白鼠后2－3周就形成大鼠慢性PH模型（Jiang BH,Tawara S,Abe K,et al.Acute vasodilator effect of fasudil, a Rho-kinase inhibitor,in monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats.J Cardiovasc Pharmacol,2007,49(2):85-89）。一般采用右心导管插入术测量右心室收缩压，确立PH的形成以及达到何种程度，同时进行心、肺组织的大体解剖和组织学评价，其病理特征类似于临床上原发性和继发性PH。病理变化主要是肺动脉血管内皮细胞损伤，平滑肌明显增生导致肺动脉血管壁的重建和右心室肥厚，肺血管重构引起的内皮损伤的。组织学特征还包括在肺动脉和小动脉中层平滑肌细胞的肥大等等。但是由于模型动物本身在生理学和解剖结构等方面与人类差别较大，特别当动物处在麻醉状态下，心率、呼吸频率的变化较大，临床表现不稳定。Jones（2002）发现，当大鼠的心率（260～450次/分）下降到200 次/min 以下时（当麻醉过深等条件下时），肺动脉血流加速时间（PAAT）的长度与肺动脉收缩压（PASP）的高度没有相关性了。临床上右心室的射血前期和射血前期与加速时间的比值都与PASP的增加具有相关性。然而大鼠模型中，射血前期不随PASP的增加而延长；反而加速时间与PASP的增加紧密关联。（JOHN E. JONES,1,2 LISA MENDES,2 M. AUDREY RUDD,2 Serial noninvasive assessment of progressive pulmonary hypertension in a rat model .  Am J Physiol Heart Circ Physiol 283: H364–H371, 2002）

陈洪茂等在对用MCT诱导的模型兔实时超声监测时，显示并不是所有PH模型兔均出现三尖瓣反流及肺动脉瓣反流，兔的肺动脉瓣反流出现率只有53.8％；三尖瓣反流出现率仅为69.2%（陈洪茂,段云友,周 宁等.实时超声监测兔慢性肺动脉高压模型的建立及其意义.中国超声医学杂志2008,24(8):864-867.）。

总的来讲，小体型实验动物由于心肺血管生理结构的不同，所建立的药物诱导模型与实际临床特征存在很大差异，同时，也不适合实时超声监测。

近年来较大的实验动物—实验用犬（杂种犬或比格犬）已用于慢性PH模型复制和研究（Takahashi M, Nakamura T, Toba T, Transplantation of endothelial progenitor cells into the lung to alleviate pulmonary hypertension in dogs. Tissue Eng. 2004 May-Jun;10(5-6):771-9）。但是犬的心脏结构与人类有很大差异，并且常常表现为心律不齐；同时犬类属于宠物，是人类的朋友，用犬做动物试验愈来愈受到动物保护主义者的限制和反对。尤其是人和犬对于药品的代谢途径不同，从而造成病理特征不同于临床。如犬缺少野百合碱的代谢酶，只能代谢野百合碱的衍生物，因此用犬做动物试验给药剂量、方法与人不同。