[发明专利]一种花椰菜隐性细胞核雄性不育系的选育与制种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蔬菜杂种优势利用的方法，特别是指花椰菜隐性细胞核雄性不育系的选育与制种的方法。

背景技术

花椰菜为十字花科芸苔属植物，是我国重要的蔬菜作物，具有明显的杂种优势，一代杂种优势已在生产上广泛应用。生产花椰菜一代杂种种子主要有三种途径。一是采用人工剥蕾杂交，二是利用自交不亲和性，三是利用细胞质雄性不育性。前两种方法已在生产上广泛应用，但第一种方法费工费时，制种成本高，而且杂交率达不到100%，种子质量不稳定；自交不亲和系亲本繁殖难度大，亲本多代自交易退化。利用雄性不育系配制一代杂种，可以克服以上两种途径的缺点，制种成本低，种子纯度高，已成为花椰菜育种的一大趋势。但我国目前花椰菜雄性不育研究较多的是将国外引进的Ogura萝卜胞质不育源转育到花椰菜中，产生胞质不育系，但该不育源存在蜜腺小、不能正常吸引昆虫授粉以及花器异常等缺点，限制了其在生产上的大面积应用。我国目前可利用的花椰菜雄性不育系还比较少，且主要来源Ogura不育源，胞质单一，血缘关系较近，可能导致配置的杂交种遗传基础狭窄，造成对环境的抵抗力下降。

发明内容

发明内容

 本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，提供一种隐性细胞核雄性不育系的选育方法，育成一种隐性细胞核雄性不育系，为花椰菜杂种优势利用提供了新的不育源，丰富了花椰菜雄性不育源的类型，可以避免不育类型过于单一造成不利影响；利用隐性细胞核雄性不育系配制优良杂交组合，建立利用隐性细胞核雄性不育系进行杂交制种的新方法，降低制种成本，提高制种效率。

为实现上述目的，本发明的选育方法的技术方案是：一种花椰菜隐性细胞核雄性不育系的选育方法,其特征在于：把花椰菜的雄性不育突变株用其姊妹株的花粉为其授粉，获得姊妹交种子，然后用姊妹交种子培育的花椰菜进行自交，后代发生育性分离，产生花朵出现微量花粉的不育株，再把花朵出现微量花粉的不育株再进行自交，分离出完全不育株，取完全不育株进行组培繁殖，保持其不育性，经过观察和筛选，从中选育出一个不育株率达100%，不育度达到或接近100%的不育系。

 本发明的制种方法的技术方案是：每年3-4月取花椰菜隐性细胞核雄性不育系的不育株花序轴和花托进行组织培养扩繁不育系，8-9月生根移栽即母本，10月上旬与相应的花椰菜自交系即父本定植于同一隔离棚内，父母本比例为1：2或1：3；始花期开始利用蜜蜂进行授粉制备杂交种。

通过上述方案育成的花椰菜隐性细胞核雄性不育系株型紧凑，叶色灰绿，蜡粉中等，从定植到采收50天左右，花球紧实洁白，内叶扣包花球。花朵开放正常，花冠淡黄色，雄蕊萎缩在基部，长度不到雌蕊的1/2，花药戟形；柱头大，开花时柱头明显外露，乳突明显，发育正常，蜜腺发达，能正常吸引蜜蜂授粉，蜜蜂授粉结实能力强。我们将该不育系编号为9901A。

花椰菜隐性细胞核雄性不育系9901A的育性表现：

花椰菜隐性细胞核雄性不育系9901A与不同花椰菜自交系杂交获得的F1全部可育，可以推断该不育材料不育性由隐性基因所控制，可育对不育为显性。F2代育性分离，表现为可育：不育分离比例接近3﹕1，推断其不育性有可能是由一对隐性基因所控制。

为了进一步确定花椰菜隐性细胞核雄性不育系的育性，我们在不同年份对花椰菜隐性细胞核雄性不育系不育株率和不育度进行了观察，同时还进行了套袋自交，结果见表1，2。结果表明，该不育系不育株率达到100%，不育度达到或接近100%。

 表1  9901A的育性表现

          表2：不育系套袋自交结实情况2002年

下面对本发明作进一步描述。

具体实施方式

用花椰菜的雄性不育突变株用其姊妹株的花粉为其授粉，获得姊妹交种子，然后用姊妹交种子培育的花椰菜进行自交，后代发生育性分离，产生花朵出现微量花粉的不育株，再把花朵出现微量花粉的不育株再进行自交，分离出完全不育株，取完全不育株进行组培繁殖，保持其不育性，经过多年观察和筛选，从中选育出一个不育株率达100%，不育度达到或接近100%的不育系（我们把所选育的花椰菜隐性细胞核雄性不育系命名为9901A）。以9901A为母本，花椰菜自交系9908为父本（父本9908是温州地方品种圆叶70天经过连续5代自交纯化育成的自交系，生育期70天左右，抗性强、花球紧实洁白、蕾粒细密、内叶扣包花球），配制出的杂交组合瓯雪60天，表现优良。

用隐性细胞核雄性不育系生产花椰菜杂交种的方法：1、隐性细胞核雄性不育系的繁殖：利用植物组织培养技术繁殖细胞核雄性不育系。一般每年3-4月份取不育株花序轴或花托进行组织培养扩繁，8-9月生根移栽。外植体在诱导培养基MS+BA 2 mg/l +2, 4-D 0.01 mg/l诱导培养20天，在增殖培养基MS+BA 0.1-0.2 mg/l +Kt 0.1-0.2 mg/l +NAA 0.001-0.003mg/l上增殖培养25天，增殖系数可达到5-6倍，连续增殖扩繁，8月份转到生根培养基1/2MS+NAA 0.1-0.3 mg/l生根培养l5天左右，生根率可达98％ 以上。生根后的试管苗开瓶炼苗2-3天，移栽到珍珠岩基质或干净的河砂中、全光照自动喷雾设施中过渡培养一至二周后移植到大田里。2、制种（1）适时定植，根据父母本的开花期进行适时播种和定植，尽可能使父母本的花期相遇，为延长父本花期,父本可以分两期定植，两期间隔时间为1-2周。母本组培苗可以在8月底9月初移植到田间，10初定植，父本9908可以于8月底9月初播种，9月底10月初分两期定植，父母本比例为1：2或1:3。（2）合理密植：制种田种植密度以每亩3500株左右为宜。(3) 严格去杂去劣,在制种的各个环节,严格拔除不符合亲本典型性状的杂株和病弱株,保证种子纯度和制种质量。（4）适时割球、疏枝引苔，去除老叶。花球接近商品花球收获阶段选择晴天进行割花球，割球前4-5天内不浇水，割后立即于切口处涂多菌灵粉和托布津粉；割球时同时除去基部老叶，保留功能叶10-12张，利于通风透光，防止棚内湿度高引起腐烂。割球后加强通风，降低棚内湿度，促进伤口愈合。花枝长到20cm左右时，根据双亲花期进行适当打苔，要疏去一部分病弱细短、花蕾发育不良、茎叶腋中发生侧枝，一般每株留5-6个健壮花枝，并搭架固定。割花枝时切面要倾斜，割后及时涂抹多菌灵粉剂以防伤口积水腐烂。（5）授粉及采收。始花期开始每个大棚放一小箱蜜蜂进行授粉。授粉结束后，要及时摘除母本后期的全部花蕾，并将父本种株拔除干净，保证种子纯度，保证种子充分成熟。当母本株种荚变黄，种子成熟时，进行分批采收，及时脱粒和晒种贮藏。