[发明专利]甘草药材全时段多波长融合指纹图谱质量控制方法

说明书

发明领域

本发明属于采用现代分析检测手段和信息处理手段对中药材的质量进行检测的技术领域，涉及一种中药材质量的控制方法，更具体的说是一种甘草药材全时段多波长融合指纹图谱质量控制方法。

背景技术

据中华人民共和国药典2010年版一部记载：本品为豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根和根茎。始载于神农本草经，列为上品。本品药性平和通行十二经脉，传统医学认为其有益气补中、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药等功效，有“十方九草”之说。临床主要用于慢性肝炎硬变、溃疡病、初发劳力性心绞痛、妊娠恶阻重症、气滞血瘀型痛经、腰椎间盘突出等疾病的治疗及慢性肝病肝组织学改善、慢性肝病肝癌变的抑制等。在我国，甘草主要产于内蒙古、甘肃、新疆、东北、山西等地区。甘草中主要含三萜类和黄酮类成分，其中三萜类成分主要有甘草酸、甘草次酸等；黄酮类成分主要有甘草苷、甘草苷元、异甘草苷等。

随着科学技术的发展，现代先进分析检测仪器的普遍使用以及信息处理技术的逐步完善，使中药分析检测水平有了显著提高，中药质量控制方法得到不断改进。近年来通过建立指纹图谱对中药材指标成分进行含量测定成为中药质量控制和评价的一种发展趋势。中药指纹图谱是指某些中药材或中成药经过适当处理后，利用现代信息采集技术和质量分析手段得到的能够显现中药材或中成药化学特征的光谱图或色谱图。由于在两个不同色谱条件下使用不同的前处理方法对甘草中甘草苷、异甘草苷和甘草酸单铵盐分别进行检测是无法实现对甘草指纹图谱进行全面和整体评价的，因此，遵循信息最大化原则建立甘草药材全时段多波长融合指纹图谱并对其指标成分进行含量测定可以获取一种较为有效的质量控制方法，从而保证甘草药材质量的安全、稳定和可靠。

甘草药材在中药材中占有十分重要的地位。目前，市售的甘草药材质量参差不齐，因此甘草药材的稳定性难以保证。2010版中国药典规定的含量测定：本品按干燥品计算，含甘草苷不得少于0.50%；甘草酸以甘草酸铵计不得少于2.0%。

发明内容

本发明目的在于采用现代分析检测手段和信息处理手段建立甘草药材的全新指纹图谱，及以该指纹图谱为基础的全时段多波长融合的含量测定方法，以确保甘草药材的质量控制方法更加简便、合理、可靠。

本发明是通过以下技术方案实现的：

甘草药材全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法，其特征在于该方法按如下步骤进行：

（1）供试品溶液的制备：取甘草药材粉末约5g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入水100mL，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液20mL，加在AB-8树脂柱上，用蒸馏水120mL洗涤，再用100mL95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加20%乙腈使溶解并转移至10mL量瓶中，加20%乙腈定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得；

（2）对照品溶液的制备：精密称取甘草酸单铵盐对照品、甘草苷对照品和异甘草苷对照品适量，加甲醇分别制成每1mL含甘草酸单铵盐对照品0.154mg、甘草苷对照品0.587mg和异甘草苷对照品0.362mg的溶液，即得； 

（3）色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基键合硅胶为填充剂的Agilent TC-C₁₈色谱柱；以0.2‰甲酸水为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱:0~10min为5%~10%B，10~61min为10%~27%B，61~70min为27%~40%B，70~90min为40%~50%B；流速1.0mL/min；柱温30℃；DAD检测器在波长254nm 、279nm和362 nm下同时进行检测；进样量10μL；理论塔板数计算，应不低于3000；

（4）全时段多波长融合：采用多波长融合指纹图谱技术将254nm 、279nm和362 nm三个波长下的谱图数据进行全时段融合，得到一张能够同时包含三个波长信息的色谱图。

（5）样品含量测定：应用融合后的指纹图谱数据，计算样品中指标成分的含量。

（6）对上述确定的含量测定方法进行有效性评价，其中包括专属性、准确度、精密度、重复性、稳定性、线性、范围以及耐用性。