[发明专利]环境颗粒物表面外源生物分子的原位检测试剂及方法有效
申请号: | 201110147663.2 | 申请日: | 2011-06-02 |
公开(公告)号: | CN102323424A | 公开(公告)日: | 2012-01-18 |
发明(设计)人: | 邬建敏;赵伟洁;唐艳艳;李臻;叶庆富 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/536 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 周烽 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 环境 颗粒 表面 生物 分子 原位 检测 试剂 方法 | ||
1.一种用于环境颗粒物表面外源生物分子的原位检测试剂,其特征在于,该试剂是一种荧光磁性纳米微球,磁性颗粒物表面修饰带有荧光基团的氨基多糖。
2.根据权利要求1所述的磁性荧光纳米微球,其特征在于,磁性颗粒物表面修饰的氨基多糖通过共价连接的方法连接各种有机荧光分子,如荧光素异硫氰酸酯,罗丹明异硫氰酸酯等。
3.根据权利要求1所述的磁性荧光纳米微球,其特征在于,磁性颗粒物表面修饰的氨基多糖为壳聚糖,或部分乙酰化的壳聚糖,或壳聚糖的衍生物。
4.根据权利要求1或2所述的磁性荧光纳米微球,其特征在于,所述磁性纳米颗粒材料是Fe3O4, Fe2O3,其尺寸小于120nm。
5.根据权利要求1或2所述的磁性荧光纳米微球,其特征在于,所述荧光标记的氨基多糖与磁性纳米颗粒在聚阴离子的交联作用下形成纳米微球;且其能够用多种共价键合方式将针对外源生物分子的抗体固定在微球表面。
6.一种应用权利要求1所述原位检测试剂的原位检测方法,其特征在于,用检测试剂与吸附有外源生物分子的环境颗粒物混合,用磁场分离磁性物质,并在磁性通道内捕获结合有磁性荧光纳米微球的目标颗粒物,并用荧光分光光度计检测目标颗粒物的荧光强度。
7.根据权利要求6所述的外源生物分子的原位检测方法,其特征在于,所述用荧光显微镜直接观察在磁性通道内带有荧光特征的颗粒物。
8.根据权利要求6所述的外源生物分子的原位检测方法,其特征在于,将磁分离后的颗粒物配置成悬浮液后,泵入毛细管通道,用激光器发射的激光聚焦后对准毛细管通道,在特定的角度用光电倍增管测量流经毛细管的颗粒物荧光发射光强度及散射光强度,并动态采集每个颗粒物流经毛细管通道后的荧光和散射光脉冲信号。
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